[發明專利]一種富集BRCA1和BRCA2基因目標區域的引物、方法、試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201710326504.6
• 申請日: 2017-05-10
• 公開（公告）號: CN107267600B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 劉建云;汪彪
• 申請（專利權）人: 北京明諦生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 秦力軍

1.一種富集BRCA1和BRCA2基因目標區域的引物組合，其特征在于，所述引物組合包括：

從其擴增區段包含BRCA1和BRCA2基因所有外顯子和外顯子側翼的內含子區域的多對引物中得到的五組引物對；

其中，所述五組引物對是根據所述多對引物對BRCA1和BRCA2基因擴增得到的擴增片段的大小進行分組得到的，以便將PCR反應數降低到5個；

其中，在對待測樣品中的BRCA1和BRCA2基因進行擴增時，利用所述五組引物對中的每組引物對分別對待測樣品中的BRCA1和BRCA2基因進行多重PCR處理，得到5組的擴增產物，實現待測樣品中的BRCA1和BRCA2基因目標區域的100％富集；

其中，每組擴增產物的擴增片段之間長度有明顯區別；

其中，所述引物組合具有如SEQ ID NO.1_SEQ ID NO.52所示的序列；

其中，所述五組引物對包括：

如SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.23、SEQIDNO.24、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.43、SEQ ID NO.44所示的第一引物組，其中，所述SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.33和SEQ ID NO.34、SEQ ID NO.43和SEQ ID NO.44為五對互為上下游引物；

如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.21、SEQIDNO.22、SEQ ID NO.27、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.37、SEQ ID NO.38所示的第二引物組，其中，所述SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.21和SEQID NO.22、SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.37和SEQ ID NO.38為五對上下游引物；

如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.35、SEQIDNO.36、SEQ ID NO.39、SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.41、SEQ ID NO.42、SEQ ID NO.49、SEQIDNO.50所示的第三引物組，其中，所述SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.31和SEQIDNO.32、SEQ ID NO.35和SEQ ID NO.36、SEQ ID NO.39和SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.41和SEQID NO.42、SEQ ID NO.49和SEQ ID NO.50為六對互為上下游引物；

如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.19、SEQIDNO.20、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.45、SEQ ID NO.46、SEQ ID NO.47、SEQIDNO.48所示的第四引物組，其中，所述SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.15和SEQIDNO.16、SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.45和SEQID NO.46、SEQ ID NO.47和SEQ ID NO.48為六對互為上下游引物；

如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.29、SEQIDNO.30、SEQ ID NO.51、SEQ ID NO.52所示的第五引物組，其中，所述SEQ ID NO.3和SEQIDNO.4、SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.51和SEQIDNO.52為四對互為上下游引物。