[發(fā)明專利]芋螺毒素αD-GeXXA中NTD結(jié)構(gòu)域及其優(yōu)化序列的制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710323048.X
• 申請(qǐng)日: 2017-05-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108864268B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王春光;楊隆金;徐少瓊;邵曉霞;大衛(wèi)·亞當(dāng);戴涵深
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 同濟(jì)大學(xué);伍倫貢大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;A61K38/17;A61P35/00;A61P25/30;A61P25/28;A61P25/18;A61P25/08;A61P25/16;A61P39/02;A61P21/04;A61P25/24;A61P9/12;A61P3/06;A61P29/00
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 吳林松;孔翰

本發(fā)明提供了一種芋螺毒素αD?GeXXA中NTD結(jié)構(gòu)域及其優(yōu)化序列的制備方法及應(yīng)用，αD?GeXXA來(lái)自中國(guó)南海將軍芋螺。本發(fā)明的αD?GeXXA的NTD、sNTD和cNTD多肽能夠特異地阻斷乙酰膽堿受體(nAChRs)(如hα9α10nAChRs)，并且具有治療神經(jīng)痛、成癮、帕金森癥、癡呆、精神分裂癥、癌癥等疾病的活性，在制備鎮(zhèn)痛與戒煙戒毒藥物、有關(guān)精神疾病與癌癥治療藥物、以及作為神經(jīng)科學(xué)工具藥等方面的良好應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種芋螺毒素αD-GeXXA中NTD結(jié)構(gòu)域及其優(yōu)化序列的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

芋螺毒素是一類由生活在熱帶或者亞熱帶海洋淺水區(qū)的軟體動(dòng)物芋螺在毒液管中分泌的小肽，能夠快速且特異性地作用于神經(jīng)系統(tǒng)，在臨床上已顯示了重要的應(yīng)用價(jià)值。

芋螺毒素的表達(dá)序列(前肽)一般包括了信號(hào)肽。信號(hào)肽在進(jìn)化上相對(duì)保守，根據(jù)其序列，將目前已知的芋螺毒素分為27個(gè)超家族，包括A-,B1-,B2-,B3-,C-,D-,E-,F-,G-,H-,I1-,I2-,I3-,J-,K-,L-,M-,N-,O1-,O2-,O3-,P-,S-,T-,V-,Y-(Kaas,Q.,R.Yu,A.H.Jin,S.Dutertre and D.J.Craik,2012:ConoServer:updated content,knowledge,and discovery tools in the conopeptide database.Nucleic acids research,40,D325-330)和Q-超家族(A.Lu,L.Yang,S.Xu and C.Wang,2014:Various conotoxindiversifications revealed by a venomic study of Conus flavidus.Molecularcellular proteomics:MCP,13,105-118)。成熟肽是芋螺毒素的活性序列，通常含有10-40個(gè)左右的氨基酸，且富含半胱氨酸。

一條芋螺毒素前肽可以通過(guò)不同的剪切方式形成多條成熟肽(A.Lu,L.Yang,S.Xuand C.Wang,2014:Various conotoxin diversifications revealed by a venomicstudy of Conus flavidus.Molecularcellular proteomics:MCP,13,105-118)，但不同成熟肽的生物學(xué)功能差異仍不得而知。

目前已知功能的芋螺毒素生物活性強(qiáng)，能特異地作用于動(dòng)物細(xì)胞膜上的受體和離子通道，對(duì)受體和離子通道的不同亞型具有很高的識(shí)別力(Terlau,H.and B.M.Olivera,2004:Conus venoms:a rich source of novel ion channel-targetedpeptides.Physiological reviews,84,41-68)。根據(jù)其作用的受體與離子通道靶點(diǎn)的不同，目前已知功能的芋螺毒素又可分為12個(gè)不同的家族(Kaas,Q.,R.Yu,A.H.Jin,S.Dutertre and D.J.Craik,2012:ConoServer:updated content,knowledge,anddiscovery tools in the conopeptide database.Nucleic acids research,40,D325-330)，包括alpha(α)，chi(χ)，delta(δ)，epsilon(ε)，gamma(γ)，iota(ι)，kappa(κ)，mu(μ)，omega(ω)，rho(ρ)，sigma(σ)和tau(τ)家族，同一超家族的芋螺毒素往往具有一個(gè)功能活性，少數(shù)具備多個(gè)家族的功能活性。

煙堿型乙酰膽堿受體(nAChRs)是動(dòng)物界中普遍存在的具有重要生理作用和臨床研究意義的跨膜蛋白，是一類配體門(mén)控型離子通道受體，由不同的α亞基和β亞基組裝成很多種亞型，每種亞型都有截然不同的藥理學(xué)特征。