[發明專利]芋螺毒素αD-GeXXA中NTD結構域及其優化序列的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201710323048.X
• 申請日: 2017-05-09
• 公開（公告）號: CN108864268B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 王春光;楊隆金;徐少瓊;邵曉霞;大衛·亞當;戴涵深
• 申請（專利權）人: 同濟大學;伍倫貢大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;A61K38/17;A61P35/00;A61P25/30;A61P25/28;A61P25/18;A61P25/08;A61P25/16;A61P39/02;A61P21/04;A61P25/24;A61P9/12;A61P3/06;A61P29/00
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 吳林松;孔翰

1.一種芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽，其特征在于：所述NTD多肽為兩個具有相同序列的多肽單體通過兩個鏈間二硫鍵所形成的反向平行的二聚體，所述多肽單體的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.如權利要求1所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD，其特征在于：所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽具有抑制乙酰膽堿受體的活性。

3.如權利要求1所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD，其特征在于：所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD通過如下方法制備：

首先，合成兩個多肽，這兩個多肽序列是αD-GeXXA中1-20的氨基酸序列；第一條多肽第六位半胱氨酸巰基沒有被保護，而第18位半胱氨酸巰基被乙酰胺基甲基保護，第二條多肽第六位半胱氨酸巰基被Acm保護，而第18位半胱氨酸巰基沒被保護；在這兩條多肽合成過程中，為避免體外氧化折疊時發生二硫鍵錯配，在二聚體中形成鏈間二硫鍵的第19位半胱氨酸被替換為絲氨酸；

其次，這兩個具有相同序列的多肽單體通過兩個鏈間二硫鍵所形成的反向平行的二聚體，第一個多肽單體的第6位半胱氨酸的巰基與第二個多肽單體的第18位半胱氨酸的巰基形成一個鏈間二硫鍵，第一個多肽單體的第18位半胱氨酸的巰基與第二個多肽單體的第6位半胱氨酸的巰基形成一個鏈間二硫鍵。

4.權利要求1所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽的應用，其特征在于：所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽在制備用于抑制乙酰膽堿受體的試劑中的應用；

所述乙酰膽堿受體為神經型乙酰膽堿受體或肌肉型乙酰膽堿受體。

5.如權利要求4所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽的應用，所述神經型乙酰膽堿受體為α9α10乙酰膽堿受體亞型、α3β2乙酰膽堿受體亞型或α4β2乙酰膽堿受體亞型。

6.如權利要求4所述的芋螺毒素αD-GeXXA的NTD多肽的應用，所述肌肉型乙酰膽堿受體為α1β1δε乙酰膽堿受體亞型。