[發(fā)明專利]HBV cccDNA的富集提取方法及檢測引物組、探針和方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710321005.8
• 申請日: 2017-05-09
• 公開（公告）號: CN106916908B
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發(fā)明（設計）人: 羅園香;謝麗娟;張曉瑋;彭春梅;鄧可基;樂小炎;張嘉;李家導;陳觀芝;林敏深;林若琳;石壯壯;莫靜嫣;李海茵;張新;王星;王法;吳彩虹
• 申請（專利權）人: 廣州海力特生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12Q1/6806;C12N15/11;C12N15/10;C12R1/93
• 代理公司: 北京精金石知識產(chǎn)權代理有限公司 11470
• 代理人: 劉曄

1.一種用于檢測HBV cccDNA的檢測引物組和檢測探針，其特征在于：所述的檢測引物組為引物組1或引物組2；所述的引物組1由以下4條引物序列組成：引物1：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；引物2：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；引物3：其核苷酸序列如SEQID NO：3所示；引物4：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；所述的引物組2由以下4條引物序列組成：引物5：其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；引物6：其核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；引物7：其核苷酸序列如 SEQ ID NO：7所示；引物8：其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；

所述的檢測探針的核苷酸序列為SEQ ID NO：9所示的序列；所述的檢測探針的核苷酸序列的5’端標記有熒光基團，所述的熒光基團為FAM、HEX、VIC、CY5和TET中的 一種；所述的檢測探針的3’端標記有的淬滅基團，所述的淬滅基團為TAMRA、MGB和BHQ中的一種。

2.如權利要求1所述的檢測引物組和檢測探針，其特征在于：所述的檢測引物組為引物組1；所述的引物組1由以下4條引物序列組成：引物1：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；引物2：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；引物3：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；引物4：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

3.如權利要求1所述的檢測引物組和檢測探針，其特征在于：所述的檢測引物組為引物組2；所述的引物組2由以下4條引物序列組成：引物5：其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；引物6：其核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；引物7：其核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；引物8：其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示。

4.一種用于檢測HBV cccDNA的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒包括權利要求1-3任意一項所述的檢測引物組和檢測探針。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒還包括內(nèi)控引物組和內(nèi)控探針；所述的內(nèi)控引物組包括下兩條引物：引物9：其核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示；引物10：其核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示；所述的內(nèi)控探針的序列為SEQ ID NO：12所示的序列；所述的內(nèi)控探針的核苷酸序列的5’端標記有熒光基團，所述的熒光基團為FAM、HEX、VIC、CY5和TET中的一種；所述的內(nèi)控探針的3’端標記有的淬滅基團，所述的淬滅基團為TAMRA、MGB和BHQ中的一種，所述的內(nèi)控探針上的熒光基團應不同于檢測探針上的熒光基團。