[發明專利]一種人肝細胞癌發生發展相關的長鏈非編碼RNA、擴增檢測方法及應用

有效

• 申請號: 201710320450.2
• 申請日: 2017-05-09
• 公開（公告）號: CN107022625B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 彭麗;李官成;蔣斌元;袁小青
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/113;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏;周棟

1.一種人肝細胞癌發生發展相關的長鏈非編碼RNA，其特征在于，所述長鏈非編碼RNA的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一種擴增、檢測權利要求1所述長鏈非編碼RNA的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包含3’RACE引物3L5、3’RACE巢式PCR引物3L5N、5’RACE引物5L5、5’RACE巢式PCR引物5L5N；所述3’RACE引物3L5序列如SEQ ID NO.2所示，所述3’RACE巢式PCR引物3L5N序列如SEQ IDNO.3所示，所述5’RACE引物5L5序列如SEQ ID NO.4所示，所述5’RACE巢式PCR引物5L5N序列如SEQ ID NO.5所示。

3.基于權利要求2所述試劑盒擴增、檢測權利要求1所述長鏈非編碼RNA的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)以人肝細胞癌HepG2細胞RNA為模板，用3’RACE引物3L5、3’RACE巢式PCR引物3L5N進行PCR獲得3’RACE產物；以人肝細胞癌HepG2細胞RNA為模板，用5’RACE引物5L5、5’RACE巢式PCR引物5L5N進行PCR獲得5’RACE產物；

(2)將3’RACE產物與5’RACE產物拼接，獲得長鏈非編碼RNA。

4.如權利要求1所述長鏈非編碼RNA在制備診斷、治療或預后預測肝細胞癌試劑或藥物中的應用。

5.一種編碼權利要求1所述長鏈非編碼RNA的DNA，其特征在于，所述DNA序列如SEQ IDNO.6所示。

6.一種用于權利要求1所述長鏈非編碼RNA中siRNA的作用靶序列，其特征在于，所述靶序列的序列如SEQ ID NO.7至SEQ ID NO.10任一所示。

7.如權利要求6所述的靶序列在制備診斷、治療或預后預測肝細胞癌疾病的藥物中的應用。

8.一種用于權利要求1所述長鏈非編碼RNA中RNAi用的短發夾片段shRNA，其特征在于，所述短發夾片段shRNA的序列如SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示。

9.如權利要求8所述的短發夾片段shRNA在制備診斷、治療或預后預測肝細胞癌疾病的藥物中的應用。

10.一種載體或重組子，其特征在于，所述載體或重組子中包含權利要求1、5、6、8任一項所述的序列。