[發明專利]天山雪蓮種子中的倍半萜內酯類化合物及其制備方法

在審

• 申請號: 201710320098.2
• 申請日: 2017-05-09
• 公開（公告）號: CN107118188A
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 阿吉艾克拜爾·艾薩;馬依拉·賽力哈孜;李俊
• 申請（專利權）人: 中國科學院新疆理化技術研究所
• 主分類號: C07D307/93
• 分類號: C07D307/93
• 代理公司: 烏魯木齊中科新興專利事務所65106
• 代理人: 張莉

技術領域

本發明為植物化學領域，具體為中藥有效成分的提取、分離與制備工藝領域，尤其涉及從雪蓮種子中提取、分離具有藥理活性的一個新的倍半萜內酯類化合物。

背景技術

天山雪蓮(Saussurea involucrata)系菊科(Asteraceae)風毛菊屬(Saussurea)植物，是新疆的著名特產，又稱新疆雪蓮，全草入藥。雪蓮分布于我國新疆天山和昆侖山一帶，生長在雪線以上。其國外分布很少，資料表明，僅在俄羅斯、哈薩克斯坦和蒙古有分布。天山雪蓮又名雪蓮花，學荷花，是維吾爾族醫常用藥材(名為“塔格依力斯”)。天山雪蓮在醫藥應用上已有數百年的歷史，中國傳統中醫理論認為雪蓮性溫，味微苦，入肝、脾、腎三經，具有散寒除濕、活血通經、強筋助陽、抗炎、鎮痛、收縮子宮等功能。民間用于治療風濕性關節炎、肩周炎等疾病、婦女小腹冷痛、閉經、胎衣不下、麻疹不透、肺寒咳嗽、陽萎等癥，在治療跌打損傷、雪盲和牙痛方面也有使用。現代藥理學證明雪蓮具有抗腫瘤、清除自由基、抗感染和免疫調節等作用。從已有文獻來看，新疆雪蓮中化學成分種類比較豐富(黃酮、萜類、香豆素和植物甾醇等)并且具有很好的藥理活性(抗炎鎮痛、抗癌、解痙降壓、終止妊娠和抗染色體損傷等)。天山雪蓮(Saussurea involucrata)種子在零攝氏度發芽，3～5℃生長，幼苗能經受-20℃的嚴寒。在生長期不到兩個月的環境里，高度卻能超過其他植物的五到七倍。它雖然要五年才能開花，但實際生長天數只有八個月。獨特的生物學特征可能造就了結構新穎的次生代謝產物。另外，通過文獻調研，目前對新疆雪蓮種子的化學成分和藥理作用進行報道的文獻還較少。因此對于新疆雪蓮種子進行化學成分及其生物活性的研究對于雪蓮藥用價值的開發具有極高的學術價值和非常重要的科學意義，不僅可對雪蓮種子的化學成分研究其有效成分及藥理功效奠定了良好的基礎，也為同類產品進一步開發再利用，提高商品技術附加值提供理論與技術支持。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種天山雪蓮種子中的倍半萜內酯類化合物及其制備方法，該化合物以天山雪蓮種子藥材為原料，用有機溶劑提取和萃取后，通過硅膠柱層析法、葡聚糖凝膠LH-20柱層析法、反相ODS柱層析、制備型高效液相色譜的三種或四種方式進行分離，采取薄層層析法檢測分析，得到天山雪蓮種子中的倍半萜內酯類化合物，化學名稱為(3S，3aR，4S，6aR，8R，9aS，9bR)-4,8-二羥基-3-甲基-6,9-二甲基二氫薁基[4,5-b]呋喃-2(9bH-酮)。

本發明所述的一種天山雪蓮種子中的倍半萜內酯化合物，該化合物的結構式(Ⅰ)為：

其中：化合物(Ⅰ)被命名為雪蓮內酯D，其化學名稱為(3S，3aR，4S，6aR，8R，9aS，9bR)-4,8-二羥基-3-甲基-6,9-二甲基二氫薁基[4,5-b]呋喃-2(9bH-酮)。

所述天山雪蓮種子中倍半萜內酯化合物的制備方法，按下列步驟進行：

a、以天山雪蓮種子為原料，粉碎后，用3-10倍體積濃度的75-95％乙醇、無水乙醇或甲醇進行室溫下冷浸提取，或溫度20-70℃加熱回流提取，提取液經減壓濃縮后得到粗提物；

b、將步驟a得到的粗提物用蒸餾水分散，用石油醚進行萃取3-5次后，水層用三氯甲烷或二氯甲烷萃取3-5次，將萃取液濃縮，得到萃取物浸膏；

c、將步驟b得到的萃取物浸膏經正相硅膠柱層析分離，經過葡聚糖凝膠LH-20柱層析或反相ODS柱層析純化后，再用高效液相色譜進行純化，即得到倍半萜內酯類化合物，為雪蓮內酯D。

步驟c中所用正相硅膠柱層析法為常壓或加壓柱層析，所用洗脫劑為二氯甲烷或三氯甲烷和甲醇的混合溶劑，采用梯度洗脫。

步驟c中葡聚糖凝膠LH-20柱層析法的洗脫劑為體積比1:1的甲醇:三氯甲烷或甲醇:二氯甲烷等度洗脫，或體積濃度10-60％的甲醇-水梯度洗脫。

步驟c中反相柱ODS柱層析采用體積濃度10-90％的甲醇-水或乙腈-水梯度洗脫。

步驟c中高效液相色譜進行分離，洗脫劑為體積濃度10-90％的甲醇-水溶液或體積濃度10-60％的乙腈-水溶液，采用梯度洗脫。

附圖說明

圖1為本發明化合物的核磁共振氫譜譜圖；

圖2為本發明化合物的核磁共振碳譜譜圖；

圖3為本發明化合物的高分辨質譜圖。

具體實施方式

實施例1