[發明專利]一種植物葉片離體培養保存方法及其應用

在審

• 申請號: 201710312053.0
• 申請日: 2017-05-05
• 公開（公告）號: CN107151644A
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發明（設計）人: 余安;鄭偉;余仲東
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01N1/02
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司11385
• 代理人: 董芙蓉

1.一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

選取整葉并留取葉柄作為預培養葉；

在玻璃皿底部的內表面上鋪設培養紙，在所述培養紙上倒入培養液；

將所述預培養葉的正面與含有所述培養液的培養紙表面相對緊密放置，使所述預培養葉的葉柄部分緊貼于所述培養紙以吸收所述培養紙中的所述培養液；

用保鮮膜密封所述玻璃皿形成密封玻璃皿，將所述密封玻璃皿置于培養室中進行培養；其中，所述培養室的恒溫溫度為25℃-28℃，每10h-14h交替選用黑暗或光照環境培養，所述密封玻璃皿內的所述預培養葉的生命存活時間為25天-100天。

2.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述植物葉片為楊樹葉片；留取的葉柄長度為2cm-3cm。

3.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述培養紙的面積為所述玻璃皿底部的內表面面積的三分之一至二分之一。

4.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述培養紙為中性濾紙、普通家用衛生紙或普通報紙。

5.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述培養液為赤霉素水溶液、普通自來水或無菌水。

6.根據權利要求5所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述赤霉素水溶液的體積濃度為1-10‰克/升。

7.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述光照環境是采用燈光照明，所述燈光照明是采用5-8根功率為15瓦的LED燈管。

8.根據權利要求1所述的一種植物葉片離體培養保存方法，其特征在于，所述密封玻璃皿內的相對濕度為100％；所述密封玻璃皿內的所述預培養葉的生命存活時間為40天-60天。

9.權利要求1-8任一項所述的一種植物葉片離體培養保存方法在植物種質保存、植物遺傳測定、植物生理活性測定以及致病性測定中的應用。