[發明專利]一種糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體及制備方法與應用

在審

• 申請號: 201710310160.X
• 申請日: 2017-05-05
• 公開（公告）號: CN107115531A
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 胡富強;孟廷廷;袁弘;袁銘
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/14;A61K47/12;A61K31/194;A61K9/127;A61P15/00;A61P29/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司33200
• 代理人: 趙杭麗

技術領域

本發明屬聚合物修飾納米結構脂質載體制備與應用，具體為包封疏水性藥物A-317491的糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體及制備方法。

背景技術

疼痛是子宮內膜異位癥的主要臨床表現癥狀，主要采用激素和手術治療。激素療法副作用大，療效不確切，手術治療易復發，因此，探索藥物治療的新方法是內異疼痛新療法發展的重要方向。ATP及其P2X₃受體可能在內異癥疼痛敏化及信息傳遞中發揮了重要作用，

A-317491是P2X₃選擇性受體拮抗劑，可抑制ATP激活P2X₃受體引起的Ca²⁺內流，抑制動作電位產生，抑制疼痛。A-317491(5-[(3-phenoxyphenyl)methyl-[(1S)-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-yl]carbamoyl]benzene-1,2,4-t ricarboxylic acid)作用于P2X₃受體高表達的內異病灶，一般情況下，藥物很難分布到該作用位點，藥物療效差。因此，采用包封A-317491的藥物傳遞系統顯得尤為重要。A-317491的結構式如下：

殼聚糖-硬脂酸嫁接物通過硬脂酸的羧基與殼聚糖上活性氨基的化學嫁接，合成的“糖脂結構”兩親性陽離子嫁接物，能在水性介質中自聚集形成膠束，并具有負載親、疏水性化療藥物和生物大分子藥物的能力。但其存在載藥能力有限的潛在局限性。

納米結構脂質載體，由固體脂質和液體脂質組成，具有包封難溶性藥物的特有優勢。納米結構脂質載體可實現A-317491的有效包封，但存在針對內異病灶P2X₃高表達部位的有效分布問題。本課題組前期研究顯示，糖脂聚合物膠束在大鼠異位內膜組織有較好分布。因此，采用糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體給藥，有可能實現A-317491的內異疼痛有效治療。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體，由殼聚糖-硬脂酸嫁接物、單硬脂酸甘油酯、油酸和疏水性藥物A-317491組成，其組成的重量百分比為：50.0～90.9wt％的殼聚糖-硬脂酸嫁接物，7.27～40.0wt％的單硬脂酸甘油酯，1.82～10.0wt％的油酸，0或3.23wt％的A-317491。

本發明所使用的殼聚糖脂肪酸嫁接物已為國家發明專利“熒光標記疏水改性殼聚糖聚合物及制備方法和應用”(專利號：ZL2005100507981)；和“表面修飾疏水改性殼寡糖聚合物給藥膠團及其制備方法”(專利號：ZL200610051601.0)所涵蓋。

本發明的另一個目的是提供所述的糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體的制備方法，通過以下步驟實現：

(1)首先采用專利號：ZL200610051601.0的方法合成殼聚糖-硬脂酸嫁接物：取硬脂酸0.13g，碳二亞胺(EDC)0.54g，精密稱定，溶于10mL無水乙醇，60℃活化50min。另取殼聚糖0.3g，精密稱定，溶于20mL去離子水，加熱至60℃。將上述乙醇溶液緩慢滴加至殼聚糖水溶液，60℃磁力攪拌反應12h。將終反應液置于透析袋中，去離子水透析48h。透析液冷凍干燥，凍干粉末分散于20mL無水乙醇，水浴超聲，加熱、趁熱0.45μm微孔濾膜過濾，除去未反應的硬脂酸，重復3次。濾餅復溶于水，冷凍干燥，得殼聚糖-硬脂酸嫁接物；

(2)分別取單硬脂酸甘油酯、油酸和A-317491，質量比為8:2:0/1。溶于無水乙醇，50℃加熱溶解，配成脂質濃度25mg/mL的溶液。取泊洛沙姆188，置于去離子水，50℃加熱溶解，配成濃度為0.1wt％的溶液。400rpm磁力攪拌條件下，將溶有脂質的乙醇溶液注入水溶液，體積比為1:10，攪拌5min，得包封A-317491的納米結構脂質載體分散液，脂質濃度約為2.5mg/mL，制備未包封/包封A-317491的納米結構脂質載體溶液；

(3)取殼聚糖-硬脂酸嫁接物，加入去離子水溶解，配成5mg/mL的殼聚糖-硬脂酸溶液，加入0.2～2倍體積的濃度為2.5mg/mL的納米結構脂質載體分散液，殼聚糖-硬脂酸與納米結構脂質載體的質量比為1～10，室溫20rpm的速度緩慢震蕩10min，得糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體。5mg/mL的殼聚糖-硬脂酸溶液加入同體積的濃度為2.5mg/mL的包封A-317491的納米結構脂質載體分散液，室溫20rpm的速度緩慢震蕩10min，得包封A-317491的糖脂聚合物修飾納米結構脂質載體。