[發明專利]一種特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR方法和試劑盒

在審

• 申請號: 201710308465.7
• 申請日: 2017-05-04
• 公開（公告）號: CN107058629A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 方園;余圣良;周健
• 申請（專利權）人: 張家港藍蘇生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司32103
• 代理人: 汪青,周敏

1.一種特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，包括特異性引物對和探針，其特征在于：

所述的特異性引物對為：

正向引物：5’-GCCGTGTGCACCCATTGTA-3’；

反向引物：5’-GGGCGTTTAGTTACGCATCCT-3’；

所述的探針為：5’-ACTCCCCACCGTGCCCTCAGC-3’。

2.根據權利要求1所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述的探針的5’端標記報告熒光素或熒光染料，3’端標記淬滅基團。

3.根據權利要求2所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述的報告熒光素或熒光染料為FAM或其它任何可以作為探針標記的熒光素或熒光染料；所述的淬滅基團為TAMRA或其它任何可以作為淬滅基團的化學物質。

4.根據權利要求1所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒還包括PCR反應液、陽性質控品和陰性質控品。

5.根據權利要求4所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述的陽性質控品含人工合成序列，所述的人工合成序列為人工合成含所述B19病毒特異性引物對擴增產物片段的序列。

6. 根據權利要求5所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述陽性質控品所含的人工合成序列為：

GGTCATTTACCATATGTACTATATGACCCTACAGCTACAGATGCAAAACAA

CACCACAGACATGGATATGAAAAGCCTGAAGAATTGTGGACAGCCAAAAGC

CGTGTGCACCCATTGTAAACACTCCCCACCGTGCCCTCAGCCAGGATGCGT

AACTAAACGCCCACCAGTACCACCCAGACTGTACCTGCCCCCTCCTATACC

TATAAGACAGCCTAACACAAAAGATATAGACAATGTAGAATTTAAGTATTT

AACCAGATATGAACAACATGTTATTAGAATGTTAAGATTGTGTAAT。

7.根據權利要求4所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：所述陰性質控品含有人工合成的人類管家基因GAPDH部分片段的特異性序列。

8.根據權利要求7所述的特異性檢測人類微小病毒B19核酸的熒光PCR試劑盒，其特征在于：用于擴增所述的人工合成人類管家基因GAPDH部分片段的引物對如下：

正向引物：5’-ATGAATGGGCAGCCGTTAG-3’；

反向引物：5’-CTCAAAGGGCAGGAGTAAAGG-3’。