[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的LAMP引物組合物及其相關(guān)應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710305262.2
• 申請(qǐng)日: 2017-05-03
• 公開（公告）號(hào): CN107099618A
• 公開（公告）日: 2017-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 方雪恩;王麗娟;成引來;黃皓;孔繼烈
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海速創(chuàng)診斷產(chǎn)品有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01;C12R1/35;C12R1/36;C12R1/725;C12R1/90;C12R1/93
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所31272
• 代理人: 竺路玲

1.一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的LAMP引物組合物，其特征在于，包括沙眼衣原體引物組、淋球菌引物組、解脲脲原體引物組、人型支原體引物組、生殖支原體引物組、單純皰疹病毒2型引物組、白念珠菌引物組、陰道毛滴蟲引物組中的任意一組或幾組，其中：

所述沙眼衣原體引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.5所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.6所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.7所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.8所示；

所述淋球菌引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.9所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.10所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.11所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.12所示；

所述解脲脲原體引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.13所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.14所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.15所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.16所示；

所述人型支原體引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.17所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.18所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.19所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.20所示；

所述生殖支原體引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.21所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.22所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.23所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.24所示；

所述單純皰疹病毒2型引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.25所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.26所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.27所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.28所示；

所述白念珠菌引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.29所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.30所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.31所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.32所示；

所述陰道毛滴蟲引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.33所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.34所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.35所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.36所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的LAMP引物組合物，其特征在于，還包括內(nèi)參引物組，所述內(nèi)參引物組正向外引物F3序列如SEQ ID NO.1所示，反向外引物B3序列如SEQ ID NO.2所示，正向內(nèi)引物FIP序列如SEQ ID NO.3所示，反向內(nèi)引物BIP序列如SEQ ID NO.4所示。

3.如權(quán)利要求1或2所述的LAMP引物組合物在制備檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的試劑或試劑盒的相關(guān)應(yīng)用。

4.一種檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的芯片，其特征在于，所述芯片固定有如權(quán)利要求1或2所述的LAMP引物組合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的芯片，其特征在于，所述芯片為恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片。

6.一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權(quán)利要求1或2所述的LAMP引物組合物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的試劑盒，其特征在于，還包括Bst DNA聚合酶、顯色染料。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的試劑盒，其特征在于，所述顯色染料選自HNB、Calcein、甲酚紅、酚紅、間甲酚紫、溴甲酚紫、中性紅、萘酚酞、百里酚藍(lán)任意一種或幾種。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括UDG酶和/或dUTP。

10.一種非診斷和治療目的的檢測(cè)泌尿生殖道致病微生物的方法，其特征在于，包括步驟：

提取待測(cè)樣本的核酸，用如權(quán)利要求1或2所述的LAMP引物組合物進(jìn)行環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增，檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物，確定待測(cè)樣本是否含有相應(yīng)引物組對(duì)應(yīng)的泌尿生殖道致病微生物。