[發(fā)明專利]一種通過酸解得到的新型抗腫瘤化合物在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710303715.8 | 申請(qǐng)日： | 2017-05-03 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN108129580A | 公開（公告）日： | 2018-06-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳奕;聶少平;謝明勇 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 南昌大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C08B37/00 | 分類號(hào)： | C08B37/00;A61P35/00;A61K36/074 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 巨噬細(xì)胞 新型抗腫瘤 酸解 刺激巨噬細(xì)胞 還原能力 黑靈芝 抗腫瘤 活化 可用 精制 分化 成熟 | ||
本發(fā)明提供了一種新型抗腫瘤化合物，以黑靈芝為原料，經(jīng)過提取、精制分離、酸解得到的產(chǎn)物PSG?TFA，能夠刺激巨噬細(xì)胞，使巨噬細(xì)胞進(jìn)一步分化成熟，成為活化的巨噬細(xì)胞，明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，對(duì)DPPH自由基的清除效果較好，具有較強(qiáng)的還原能力，可用于抗腫瘤。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種新型抗腫瘤化合物，尤其涉及一種通過酸解得到的新型抗腫瘤化合物。
背景技術(shù)
近年來隨著人們生活方式的改變和醫(yī)療技術(shù)的提高，腫瘤檢出人數(shù)也呈增高趨勢(shì)，腫瘤已成為對(duì)人類健康造成嚴(yán)重威脅的重要疾病之一，由于對(duì)患者機(jī)體具有較高的損害性和較高的病死率，抗腫瘤藥物的應(yīng)用和研究一直是人們所關(guān)注的焦點(diǎn)，新的治療理論和新型藥物不斷被開發(fā)和應(yīng)用。
科學(xué)家們合成了許多分子靶標(biāo)明確的抗腫瘤分子藥物，但是由于化學(xué)合成藥物的開發(fā)周期長以及研發(fā)費(fèi)用昂貴，且臨床毒副作用大，制約了藥物的進(jìn)一步研發(fā)和應(yīng)用。中草藥和植物藥等天然藥用材料中存在著廣泛的生物活性物質(zhì)，研究者可從中藥中尋找毒副作用小、藥理作用獨(dú)特的抗腫瘤藥物及抗腫瘤輔助藥物。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新型抗腫瘤藥物，對(duì)免疫巨噬細(xì)胞則有明顯的激活作用，通過刺激機(jī)體的免疫功能來消滅腫瘤細(xì)胞，而不是通過細(xì)胞毒作用直接抗腫瘤。
本發(fā)明的技術(shù)方案為：
一種通過酸解得到的新型抗腫瘤化合物，制備方法如下：
(1)取干燥黑靈芝藥材100g，加95％乙醇室溫浸泡提取48h，過濾，重復(fù)一次，藥渣于室溫下置通風(fēng)處晾干，然后將藥渣與蒸餾水按質(zhì)量體積(kg/L)比為1：20的比例混合，回流提取兩次，每次提取時(shí)間依次為2h，1h，合并提取液，離心分離，減壓濃縮；所得樣品加入適量的95％乙醇使溶液中使得乙醇的體積分?jǐn)?shù)為80％，然后進(jìn)行沉淀，4℃下靜置24h，離心過濾；沉淀物合并，依次以無水乙醇、無水乙醚、丙酮洗滌沉淀物，冷凍干燥得樣品；取得到的干燥樣品，以Sevag法除蛋白，即Sevag試劑(體積比氯仿∶正丁醇＝5∶1)和干燥樣品以質(zhì)量比1∶1混勻，靜置，除去下層蛋白質(zhì)變性層；將樣品濃縮，重復(fù)除蛋白操作10次；濃縮除蛋白樣品后用95％乙醇洗滌，再濃縮，凍干得粗提物樣品；將粗提物樣品使用透析袋透析3天，將袋內(nèi)樣品濃縮至小體積，冷凍干燥，得黑靈芝精提物；
(2)取上述得到的黑靈芝精提物500mg，加入蒸餾水配成濃度為3～5mg/mL的溶液，離心，上清液過凝膠柱層析，使用的層析系統(tǒng)是Purifier 100生物大分子純化系統(tǒng)，凝膠柱Hiload 26/60Superdex-200prep grade，上樣前將樣品和洗脫液過0.22μm微孔濾膜以保護(hù)分離柱，洗脫液為蒸餾水，流速為2mL/min，上樣體積為5mL，分部收集體積為8mL/管，紫外檢測(cè)器和示差折光檢測(cè)器檢測(cè)(RID-10A示差檢測(cè)器)在線監(jiān)測(cè)洗脫情況；取第6-14管合并，濃縮，冷凍干燥得到黑靈芝提取物PSG，為黃色或棕色的絮狀固體；
(3)取黑靈芝提取物PSG50mg于50mL圓底燒瓶中，加入TFA(三氟乙酸)溶液10mL，振蕩溶解后，密塞，置于60℃水浴中保溫水解40min，間歇振蕩，待反應(yīng)液冷卻后，于40℃減壓濃縮并將其轉(zhuǎn)移至透析袋中，用蒸餾水透析3天，收集袋內(nèi)溶液，分別經(jīng)減壓濃縮和冷凍干燥后得到產(chǎn)物，記為PSG-TFA。
本發(fā)明得到的酸解產(chǎn)物PSG-TFA，能夠刺激巨噬細(xì)胞，使巨噬細(xì)胞進(jìn)一步分化成熟，成為活化的巨噬細(xì)胞，明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，對(duì)DPPH自由基的清除效果較好，具有較強(qiáng)的還原能力，可用于抗腫瘤。
附圖說明
圖1為PSG-0.1M TFA的高效凝膠滲透色譜圖。
圖2為PSG、PSG-0.05M TFA和PSG-0.1M TFA樣品的紅外光譜圖。
圖3為PSG和PSG-0.1M TFA清除DPPH自由基的能力的示意圖。
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