[發明專利]一種17α?羥孕酮分子印跡固相萃取柱及其制備方法與檢測17α?羥孕酮的方法

在審

• 申請號: 201710301012.1
• 申請日: 2017-05-02
• 公開（公告）號: CN107029453A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: 孫恬;陸智;譚麗容;蘇杰雄;潘海朋;劉鳳松;程敏
• 申請（專利權）人: 無限極（中國）有限公司
• 主分類號: B01D15/22
• 分類號: B01D15/22;B01D15/20;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 趙青朵

技術領域

本發明屬于食品安全檢測技術領域，具體涉及一種17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱及其制備方法與檢測17α-羥孕酮的方法。

背景技術

17α-羥孕酮(17α-Hydroxyprogesterone，17α-OHP)是一種內源性孕激素，分子式為C₂₁H₃₀O₃。在體內，17α-羥孕酮是在合成糖皮質激素和性類固醇過程中產生的，可以在17α-羥化酶作用下由孕酮轉化，或者在3β-羥類固醇脫氫酶作用下由17α-羥孕烯醇酮轉化，主要產生于腎上腺，部分產生于性腺。17α-羥孕酮在血液中主要與性激素共同作用，促進個體器官的發育。然而目前一些不法商販在畜禽水產養殖及保健品中非法添加17α-羥孕酮等激素，促進畜禽生長，這些激素會殘留在畜禽產品、水產品、保健品中，并通過食物鏈進入人體，在人體內積累。而過多的激素會使體內激素分泌系統紊亂，導致多種機能障礙，兒童攝入過多激素還會影響身體發育，導致性早熟等不良后果。

食品、保健品中17α-羥孕酮濃度低，基質復雜，對檢測方法具有較高的要求。目前17α-羥孕酮的檢測方法主要有酶聯免疫法、液相色譜-質譜法和氣相色譜-質譜法。酶聯免疫法檢測17α-羥孕酮，特異性高，但是在檢測樣品之前，需要對樣品進行層析分離或其它方法純化，造成整個檢測過程冗長復雜。此外，前期樣品處理過程容易造成待分析成分的丟失。液相色譜-質譜法和氣相色譜-質譜法檢測食品、保健品中的17α-羥孕酮對儀器有較高的要求，檢測的準確性和靈敏度較低。因此急需一種17α-羥孕酮的檢測方法，用于解決現有技術檢測食品、保健品中17α-羥孕酮對檢測儀器要求高、檢測準確性低、檢測靈敏度低的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱，用于解決現有技術中檢測食品、保健品中17α-羥孕酮對檢測儀器要求高、檢測準確性低、檢測靈敏度低的問題。

本發明的具體技術方案如下：

本發明提供了一種17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱，包括17α-羥孕酮分子印跡聚合物和空柱，17α-羥孕酮分子印跡聚合物裝填于空柱中。

優選的，所述17α-羥孕酮分子印跡聚合物的粒徑為28～50μm。

在本發明中提供了所述17α-羥孕酮分子印跡聚合物的制備方法，包括：將模板分子17α-羥孕酮、功能單體與4-乙烯基吡啶混勻，加入交聯劑、引發劑，在氮氣和/或惰性氣體環境下反應后，去除模板分子17α-羥孕酮。

優選的，所述功能單體為甲基丙烯胺；

所述交聯劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯；

所述引發劑為偶氮二異丁腈。

優選的，所述模板分子17α-羥孕酮、功能單體與4-乙烯基吡啶的摩爾比為1:2:3；

所述模板分子17α-羥孕酮與交聯劑的摩爾比為1:20；

所述模板分子17α-羥孕酮與引發劑的摩爾比為1:0.12。

優選的，所述反應的溫度為60℃，時間為24h。

本發明還提供了一種檢測17α-羥孕酮的方法，包括：

a)對17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱進行活化，得到活化后的17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱；

b)用有機溶劑對樣品進行提取，得到提取液；

c)將步驟b)得到的提取液注入活化后的17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱后，用淋洗液進行淋洗，再用洗脫溶液洗脫，得到洗脫液；

d)將步驟c)得到的洗脫液用氮氣和/惰性氣體吹干，加入有機溶劑混合后過濾膜，得到溶液，進行上機測定。

優選的，步驟a)中所述活化具體為：向17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱依次加入甲醇和水。

優選的，步驟b)中所述有機溶劑為甲醇；

步驟c)中所述淋洗液為20％甲醇水溶液；

所述洗脫液為甲醇乙酸體積比為9:1的溶劑。

優選的，步驟d)中所述有機溶劑為甲醇；

所述濾膜的孔徑為0.22μm。

綜上所述，本發明提供了一種17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱，包括17α-羥孕酮分子印跡聚合物和空柱，17α-羥孕酮分子印跡聚合物裝填于空柱中。與現有技術相比，該分子印跡固相萃取柱對17α-羥孕酮的特異性強、選擇性高，能夠從復雜體系中選擇性的吸附模板分子17α-羥孕酮，對其進行選擇、富集和純化。使用本發明17α-羥孕酮分子印跡固相萃取柱用于檢測17α-羥孕酮對檢測儀器要求較低、檢測準確性高、檢測靈敏度高。

附圖說明