[發(fā)明專利]一種地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基和發(fā)酵方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710300429.6
• 申請日: 2017-05-02
• 公開（公告）號(hào): CN108795792A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李剛;張敏潔;金圣芳
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江京新藥業(yè)股份有限公司;上海京新生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基和發(fā)酵方法，培養(yǎng)基中含有磷酸鹽和錳鹽，能促進(jìn)地衣芽孢桿菌快速生長，使芽孢桿菌快速進(jìn)入對數(shù)生長期，同時(shí)能延長菌體生長期，從而大大提高地衣芽孢桿菌產(chǎn)品產(chǎn)量。該培養(yǎng)基的發(fā)酵方法為種子的活化、一級(jí)搖瓶種子培養(yǎng)和發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)等步驟。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基和發(fā)酵方法。

背景技術(shù)

地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)是一種包含許多有特殊功能的菌株,在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)等科學(xué)領(lǐng)域研究中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。目前地衣芽孢桿菌的發(fā)酵工藝普遍存在著發(fā)酵水平偏低，芽孢形成不一致，產(chǎn)品數(shù)量和質(zhì)量不穩(wěn)定等缺陷。

現(xiàn)有技術(shù)為了提高地衣芽孢桿菌的發(fā)酵水平，一方面，通過發(fā)酵培養(yǎng)過程中對發(fā)酵工藝的調(diào)整如調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度、壓力、時(shí)間等工藝條件，從而提高地衣芽孢桿菌產(chǎn)量，但實(shí)際操作起來甚為麻煩，同時(shí)增加了生產(chǎn)成本，并不能大幅提高產(chǎn)量；另一方面，通過對地衣芽胞桿菌培養(yǎng)基配方進(jìn)行調(diào)整，現(xiàn)有的一般生產(chǎn)地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基配方的主要成分為氮源、碳源、無機(jī)鹽等，其中無機(jī)鹽的選擇較多，例如鈉鹽、鉀鹽、鐵鹽、鎂鹽和鈣鹽等。某些地芽孢桿菌培養(yǎng)基中添加了少量的磷酸鹽或錳鹽，但芽孢桿菌生長并不明顯，《微量元素Mn離子對DY芽孢桿菌芽孢形成影響的研究》(中國微生態(tài)學(xué)雜志2013年12月第25卷第12期)公開了錳離子能顯著提升DY芽孢桿菌發(fā)酵過程中芽孢形成率，影響菌體生長曲線，促進(jìn)芽孢的形成，使菌體活性更高，從而使發(fā)酵效果得到顯著提升。有關(guān)磷酸鹽促進(jìn)地衣芽孢桿菌的快速生長的文獻(xiàn)還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基可促進(jìn)地衣芽孢桿菌快速生長，使芽孢桿菌快速進(jìn)入對數(shù)生長期，同時(shí)能延長菌體生長期，從而大大提高芽孢桿菌的產(chǎn)量。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來解決上述技術(shù)問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基含磷酸鹽和錳鹽。

本發(fā)明提供的地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基主要成分為本領(lǐng)域常規(guī)，其主要成分還包括：氮源、碳源和氯化鈉。

本發(fā)明提供的地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基主要成分為本領(lǐng)域常規(guī)。氮源選自蛋白胨、花生餅粉、黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉和尿素中的一種或多種，優(yōu)選蛋白胨。碳源選自牛肉膏、玉米淀粉、玉米漿、乳糖、蔗糖和葡萄糖中的一種或多種，優(yōu)選牛肉膏。磷酸鹽選自磷酸二氫銨、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉中的一種或多種。錳鹽可選自氯化錳或硫酸錳。

本發(fā)明中氮源為本領(lǐng)域常規(guī)，所述氮源的含量范圍較佳地為5～30g/L。

本發(fā)明中碳源為本領(lǐng)域常規(guī)，所述碳源的含量范圍較佳地為3～7g/L。

本發(fā)明中氯化鈉為本領(lǐng)域常規(guī)，所述氯化鈉的含量范圍較佳地為5～15g/L。

本發(fā)明中磷酸鹽為本領(lǐng)域常規(guī)，所述磷酸鹽的含量范圍較佳地為0.1～6g/L。

本發(fā)明中錳鹽為本領(lǐng)域常規(guī)，所述錳鹽的含量范圍較佳地為0.03～10.0g/L。

較佳地，所述培養(yǎng)基的主要成分包括：蛋白胨5～30g/L、牛肉膏3～7g/L、氯化鈉5～15g/L、磷酸鹽0.1g/L～6.0g/L和錳鹽0.03mg/L～10.0mg/L。

更佳地，所述培養(yǎng)基的主要成分包括：蛋白胨7～12g/L、牛肉膏4～6g/L、氯化鈉7～13g/L、磷酸鹽1.0～3.0g/L和錳鹽0.03～3.0mg/L。