[發(fā)明專利]柴胡皂苷元A和D的制備方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710292662.4 | 申請日： | 2017-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN108796022B | 公開（公告）日： | 2022-01-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王強(qiáng)利;趙亮;王瑩;王亞輝;國海東;唐少旗 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海中醫(yī)藥大學(xué) |
| 主分類號： | C12P33/00 | 分類號： | C12P33/00;A61K31/56;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海唯智贏專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31293 | 代理人： | 吳瑾瑜 |
| 地址： | 201203 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 柴胡 皂苷 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，步驟包括：
（1） 柴胡總皂苷溶液中加入復(fù)合植物水解酶，在pH=4.5～6的條件下，40～60℃反應(yīng)15～30小時(shí)；復(fù)合植物水解酶為Viscozyme L；柴胡總皂苷與復(fù)合植物水解酶的用量比為1kg：2～15g；或者，以柴胡的原藥重量計(jì)，與復(fù)合植物水解酶的用量比為1kg：0.1～1g；
（2） 步驟（1）的柴胡皂苷酶解液用有機(jī)溶劑萃取，合并萃取液并濃縮干燥，取固體；
（3） 步驟（2）的固體溶解于醇，制備液相色譜法分離，制備液相色譜分離條件為：采用C18柱，用乙腈-水作為流動相進(jìn)行梯度洗脫，得到柴胡皂苷元A和柴胡皂苷元D。
2.權(quán)利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，步驟（2）所述的有機(jī)溶劑為氯仿；步驟（3）所述的醇為甲醇。
3.權(quán)利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述的梯度洗脫條件為：a.第一階段時(shí)間18～25min，乙腈體積含量由30%～35%勻速變?yōu)?2%～68%； b. 第二階段時(shí)間8～12min，乙腈體積含量由62%～68%勻速變?yōu)?0%～35%。
4.權(quán)利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述的梯度洗脫條件為：第0～20min，乙腈體積含量由35%勻速變?yōu)?6%；第20～30min，乙腈體積含量由66%勻速變?yōu)?5%，收集洗脫段。
5.權(quán)利要求4所述柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，第15～18min洗脫段為柴胡皂苷元D，第22～25min洗脫段為柴胡皂苷元A。
6.權(quán)利要求1所述柴胡皂苷元A和D的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，柴胡總皂苷溶液的制備方法包括：柴胡粉碎后加入65%～85%乙醇，調(diào)節(jié)pH=7.5～8.5，70～85℃回流提取2～4次，每次乙醇與柴胡的用量比為8～15L:1kg；合并提取液，并去除乙醇。
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