[發(fā)明專利]一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710279710.6
• 申請(qǐng)日: 2017-04-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107449838B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈錫權(quán);嚴(yán)小軍;徐繼林;陳俊粵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寧波大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：具體步驟如下：1)材料制備：采集大黃魚(yú)肌肉；

2)對(duì)大黃魚(yú)肌肉進(jìn)行總脂的抽提，皂化，甲酯化；

3)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析：對(duì)脂肪酸甲酯化樣品進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析，獲得氣相色譜保留時(shí)間和質(zhì)譜圖；

4)定性與定量分析脂肪酸：根據(jù)氣相色譜保留時(shí)間和質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)對(duì)比，分析獲取各種脂肪酸的種類，采用面積歸一法計(jì)算出各脂肪酸組分的百分含量；

5)鑒別分析：當(dāng)所述肌肉中脂肪酸[C18：1/(C20：1+C22：1)]＜5.0時(shí)，判別所采集的大黃魚(yú)為岱衢族大黃魚(yú)；當(dāng)所述肌肉中脂肪酸[C18：1/(C20：1+C22：1)]＞5.0時(shí)，判別所采集的大黃魚(yú)為閩-粵東族大黃魚(yú)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：當(dāng)所述肌肉中脂肪酸C20：5/C20：4＞4.0時(shí)，判別所采集的大黃魚(yú)為岱衢族大黃魚(yú)；當(dāng)所述肌肉中脂肪酸C20：5/C20：4＜4.0時(shí)，判別所采集的大黃魚(yú)為閩-粵東族大黃魚(yú)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：所述肌肉采集自大黃魚(yú)背部側(cè)線位置。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：其中，步驟2)中取背部側(cè)線位置肌肉冷凍干燥后，準(zhǔn)確稱取0.1g干重肌肉提取總脂。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：其中，步驟3)中的氣相色譜條件為：進(jìn)樣口溫度250℃，載氣為純度為99.999％的高純氦，柱流速0.81ml/min，柱前壓73.0KPa，柱起始溫度150℃，保持3.5min后，以20℃/min升至200℃，再以5℃/min升至280℃，保持37min；分流進(jìn)樣1μL，分流比50∶1；

質(zhì)譜條件為：離子源選用電子轟擊源，電子能量為70eV，離子源溫度200℃，接口溫度250℃，選取全程離子碎片掃描模式，質(zhì)量掃描范圍為40～600，溶劑延遲3.5min；用化學(xué)電離源分析時(shí)，反應(yīng)氣為甲烷。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于脂肪酸組成差異性鑒別岱衢族與閩-粵東族大黃魚(yú)的方法，其特征在于：其中，步驟2)中總脂的皂化方法為：在總脂中加入2mL5％-6％的氫氧化鉀-甲醇水4∶1(V/V)溶液，60℃溫度下水浴2h，冷卻后移到離心管中，加入1ml的飽和NaCl溶液，再用1∶1(V/V)鹽酸調(diào)節(jié)pH至小于1后，1∶4氯仿∶正己烷(V/V)6ml分三次混合均勻后提取，提取液合并后加2ml蒸餾水取上層液后，旋轉(zhuǎn)干燥；

甲脂化方法為：向皂化后的樣品中，加入0.5mL14％BF₃-甲醇液，60℃的水浴鍋中加熱1h，取出冷卻后轉(zhuǎn)移到離心管中，用4ml正己烷分兩次加入樣品瓶浸潤(rùn)后分別加入試管中提取，再加入3ml的1∶4氯仿∶正己烷(V/V)提取，合并提取液后，加入3g無(wú)水Na₂SO₄靜置5-6小時(shí)，取上層液蒸干，用1mL色譜純正己烷定容后，上機(jī)分析。