[發明專利]用于黃曲霉毒素凈化的多功能磁性納米粒子及其制備方法

有效

• 申請號: 201710278488.8
• 申請日: 2017-04-25
• 公開（公告）號: CN107029655B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發明（設計）人: 張雪佩;方東升;陳有鐘;周璟明;陳秀明;周劍;鄭孝賢;王海;龍徐蘭
• 申請（專利權）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號: B01J20/02
• 分類號: B01J20/02;B01J20/06;B01J20/28;C08F292/00;C08F212/08;C08F220/32;C08F212/36;A23L5/20
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

本發明屬于黃曲霉毒素凈化處理技術領域，具體涉及一種用于黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2凈化的多功能磁性納米粒子，并進一步公開其制備方法。本發明所述多功能磁性納米粒子包括：由磁性納米粒子構成的內核層、包覆所述內核層的烷化層、以及由多功能官能團修飾的外殼層。本發明所述磁性納米粒子具有加大的比表面積，對多種官能團的固定化容量很高，可有效捕獲牛奶中的黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2，樣品凈化效率高，分離效率和回收率高達80％?90％。

技術領域

本發明屬于黃曲霉毒素凈化處理技術領域，具體涉及一種用于黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2凈化的多功能磁性納米粒子，并進一步公開其制備方法。

背景技術

黃曲霉毒素(AFT)是公認的天然強致癌物質之一，其中以黃曲霉毒素B1(AFTB1)毒性最大。黃曲霉毒素B1為黃曲霉菌、寄生曲霉毒產生的代謝產物，具有致癌、致畸、致突變的作用，是迄今發現的最穩定的一種真菌毒素。目前一般的食品加工條件都不易破壞其毒性，因此給食品安全埋下了巨大的隱患。各國對食品中黃曲霉毒素的殘留非常重視，制定了相應的限量標準。

目前，用于黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的凈化技術主要有免疫親和柱、多功能凈化小柱等。傳統的多功能凈化小柱是以極性、非極性及離子交換等基團組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白質類等雜質，毒素不被吸附而直接通過，從而達到對多種毒素的凈化處理。但是由于這些多功能精華小柱填充顆粒多為直徑較大的微米球，比表面積相對較小，官能團固載量較低，造成低的凈化效率；同時這些凈化柱價格昂貴，且多為一次性使用，這使得分析成本較高、耗時較長，嚴重制約了對食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的安全監測和凈化。

對于黃曲霉毒素的凈化而言，有關對磁性納米粒子進行修飾，并應用于磁性納米粒子分離純化的研究已有報道。磁性納米材料是20世紀80年代出現的一種新型材料，研究和開發新型納米磁性材料已經引起世界各國的廣泛興趣。磁性納米粒子具有超高的比表面積，大大提高了官能團的固載量，且易于進行化學修飾以實現多種用途。經修飾后的磁性納米粒子能夠與被測試樣品相結合，在外加磁場的作用下可以快速從復雜的樣品中實現分離，因此凈化效率更高、成本更低。

中國專利CN102680673A公開了一種用于凈化黃曲霉毒素樣本的免疫磁性微粒，是將黃曲霉毒素B1抗體與磁性微粒共同反應一段時間后，制備出具有特異性的免疫磁性微粒，可實現黃曲霉毒素親和吸附到免疫磁性微粒表面。又如中國專利CN104959114A分別公開了一種將黃曲霉毒素B1核酸適配體與磁性微粒偶聯，制備所得具有特異性的免疫磁性微粒，可用于樣品中黃曲霉毒素B1的分離純化。上述兩種免疫磁性微粒能夠有效分離凈化黃曲霉毒素B1，并改善了分離效率；但是上述免疫磁性微粒均是僅僅針對黃曲霉毒素B1的凈化制得，其只能夠凈化黃曲霉毒素B1而對其他真菌毒素無作用，這也間接使得對整體毒素的凈化效率略低。因此，對于復雜樣品中微量的多種真菌毒素的快速、有效的分離凈化仍是亟待解決的問題。

發明內容

為此，本發明所要解決的技術問題在于提供一種用于黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2凈化的多功能磁性納米粒子，以解決現有技術中凈化黃曲霉毒素的磁性顆粒凈化效率較低的問題。

為解決上述技術問題，本發明所述的用于黃曲霉毒素凈化的多功能磁性納米粒子，所述磁性納米粒子包括：

由磁性納米粒子構成的內核層；

包覆所述內核層的烷化層；

由多功能官能團修飾的外殼層。

所述硅烷化層沿靠近所述內核層方向包括第一硅烷化層和第二硅烷化層；所述第一硅烷化層為四乙氧基硅烷層；所述第二硅烷化層為甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷層。

所述硅烷化層為由四乙氧基硅烷和甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷鍵合包覆的硅烷化層。

所述外殼層為苯乙烯-二乙烯苯-甲基丙烯酸縮水甘油酯修飾層。