[發(fā)明專利]馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710277316.9
• 申請日: 2017-04-25
• 公開（公告）號: CN106918572A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發(fā)明（設計）人: 張泓;戴小楓;胡宏海;張春江;姚曉靜;黃艷杰;徐芬;張良;劉倩楠;黃峰;張雪;張榮;吳娛;譚瑤瑤;趙悅;田芳
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號: G01N21/359
• 分類號: G01N21/359;G01N21/3563;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙)11369
• 代理人: 史霞

1.一種馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，包括：

步驟一，基于熒光定量PCR技術(shù)檢測待檢測馬鈴薯復配主食中是否含有如SEQ ID NO：1所示的特異堿基序列中的部分序列，采用的熒光定量PCR的引物為SEQ ID NO：2和3所示的堿基序列，其具體步驟包括：

1.1)取標準陽性樣品，利用如SEQ ID NO：2和3所示的堿基序列進行熒光定量PCR反應，并繪制標準陽性樣品的馬鈴薯質(zhì)量百分比的對數(shù)值與循環(huán)閾值Ct值之間的標準曲線和溶解曲線；

1.2)取待檢測馬鈴薯復配主食，利用如SEQ ID NO：2和3所示的堿基序列進行熒光定量PCR反應，并繪制待檢測馬鈴薯復配主食的馬鈴薯質(zhì)量百分比的對數(shù)值與循環(huán)閾值Ct之間的擴增曲線和溶解曲線；

1.3)比較待測馬鈴薯復配主食的擴增曲線和溶解曲線各自分別與標準陽性樣品的標準曲線和溶解曲線的相似性，若待測馬鈴薯復配主食的擴增曲線與標準陽性樣品的標準曲線基本相同，且Ct≤34.5，同時，待測馬鈴薯復配主食的溶解曲線與標準陽性樣品的溶解曲線基本相同，且Tm值介于78.19℃～78.59℃之間，則判定所述待測馬鈴薯復配主食中含有馬鈴薯全粉或薯泥；

若該待測馬鈴薯復配主食中含有馬鈴薯全粉或薯泥，則進入步驟二；

步驟二，基于近紅外光譜技術(shù)測定待測馬鈴薯復配主食中的馬鈴薯全粉或薯泥含量：

2.1)取多個樣品，該多個樣品中的馬鈴薯全粉或薯泥含量已知，利用近紅外光譜儀于掃描范圍890～1100nm內(nèi)掃描每個樣品，經(jīng)過處理得到每個樣品的近紅外光譜特征峰；

2.2)利用建模軟件將該多個樣品的近紅外光譜特征峰與馬鈴薯全粉或薯泥含量之間進行分析，經(jīng)過多元散射校正進行近紅外光程的校正以消除光程差異，同時采用卷積平滑一階導數(shù)對光譜進行平滑預處理，在全光譜850-1100nm范圍內(nèi)，采用偏最小二乘法合并交互驗證的方法，建立馬鈴薯的近紅外光譜特征峰與馬鈴薯全粉或薯泥含量的定標方程；

2.3)利用近紅外掃描儀于掃描范圍890～1100nm內(nèi)掃描待測馬鈴薯復配主食，經(jīng)過處理得到待測馬鈴薯復配主食的近紅外光譜特征峰，基于所述定標方程計算得到待測馬鈴薯復配主食中的馬鈴薯全粉或薯泥的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，所述馬鈴薯全粉包括馬鈴薯熟全粉和馬鈴薯生全粉。

3.如權(quán)利要求1所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，步驟2.1)中，所述多個樣品的馬鈴薯全粉或薯泥含量從0％至100％，且每個樣品中的馬鈴薯全粉或薯泥的含量均不相同，其中任意兩個樣品的馬鈴薯全粉或薯泥的含量的差值不小于1％。

4.如權(quán)利要求1所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，步驟2.1)和2.3)中，利用近紅外掃描儀掃描后得到某一類樣品的原始光譜，采用MSC和S-G-1^st平滑處理分別對原始光譜進行預處理得到所述近紅外光譜特征峰。

5.如權(quán)利要求1所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，步驟2.1)中，每個樣品利用近紅外光譜儀重復掃描3次。

6.如權(quán)利要求1所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，步驟2.2)中，所述建模軟件為Grams，所述定標方程中，馬鈴薯全粉或薯泥的最佳主因子數(shù)為9。

7.如權(quán)利要求1至5任一所述的馬鈴薯復配主食中馬鈴薯含量的測定方法，其特征在于，在所述步驟二中，基于近紅外光譜技術(shù)測定待檢測馬鈴薯復配主食中的馬鈴薯全粉或薯泥含量之前，首先將馬鈴薯復配主食根據(jù)主成份和加工工藝的不同而分成若干類，基于所述近紅外光譜技術(shù)測定待檢測同一類馬鈴薯復配主食中的馬鈴薯全粉或薯泥含量。