[發明專利]一種鑒別荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜的分析方法

有效

• 申請號: 201710269827.6
• 申請日: 2017-04-24
• 公開（公告）號: CN107192770B
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發明（設計）人: 王駿;耿越;宿書芳;江瑤;祝建華;王凱利
• 申請（專利權）人: 山東省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/14
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 董潔

本發明公開一種鑒別荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜的分析方法，具體是應用超高效液相色譜?四極桿?軌道阱高分辨質譜技術結合代謝組學方法，包括：將真荊條蜜樣品和與待檢測的糖漿摻假荊條蜜樣品分別采用有機溶劑進行前處理后，應用超高效液相色譜?四極桿?軌道阱高分辨質譜方法實現對前處理后的樣品中的化學成分的分離與測定，然后對得到真荊條蜜樣品與待測的荊條蜜樣品的UHPLC?MS原始數據進行預處理，最后應用多元統計分析方法主成分分析區分真荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜。本發明是在對荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜的代謝物信息進行一個全面的獲取后，結合多元統計分析，對荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜進行全面分析，完成對糖漿摻假荊條蜜的檢測。

技術領域

本發明屬于食品摻假鑒別技術領域，具體涉及一種應用UHPLC-Q Exactive聯用的代謝組學技術鑒別荊條蜜與糖漿摻假荊條蜜的分析方法。

背景技術

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，與自身分泌物混合后，經充分釀造而成的天然甜物質，蜂蜜營養價值高，其中，荊條蜜是荊條花蜂蜜的簡稱，也叫荊花蜜。是四大名蜜之一；也是我國大宗蜜源中每年最穩收的蜜品之一。不僅是理想的滋補營養食品，而且可以止咳潤肺、健胃通便、防暑清心，并有補身益氣、延年益壽之功效。

但是由于蜂蜜較高的價格和較低的產量，使得蜂蜜成為不法商販摻假的一個主要對象，為了提高蜂農的生產積極性、保障消費者的利益，為了支持正規蜂蜜生產企業的公平競爭、維護蜂蜜市場的秩序，促進我國蜂蜜產業的健康發展，因此對于找到真正蜂蜜樣品的標志性代謝物，從而嘗試建立一套靈敏、高效、準確的蜂蜜摻假鑒定方法具有非常重要的意義與價值。

在真蜂蜜中摻入果葡糖漿、淀粉糖漿、大米糖漿等：這是目前最常用的蜂蜜摻假手段，由于這些糖漿的果糖和葡萄糖比例與蜂蜜中的成分非常相似，摻入后各項檢測指標完全符合國家標準，給檢測造成了很大的困難。目前常用于蜂蜜摻假進行鑒定的方法有穩定碳同位素比值分析法(SCIRA)、薄層色譜法(TIC)、脈沖電流檢測器的高效陰離子交換色譜法(HPAEC-PAD)、氣相色譜質譜聯用技術(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、高效液相同位素質譜儀聯用技術(HPLC-IRMS)、核磁共振技術(NMR)以及近紅外光譜(NIRS)等。現有的方法對于測定蜂蜜摻假有許多弊端：穩定碳同位素比值分析法(SCIRA)這種方法只對天然蜂蜜中摻入C4植物糖有效，如果蜂蜜中摻入利用水稻、小麥、大豆等C3植物淀粉制備的糖類成分或利用水稻、小麥、大豆等C3植物淀粉制備的糖類物質與其他物質配制的全假蜂蜜，則難以鑒別。Kushnir等利用薄層色譜法測定玉米糖漿摻假的蜂蜜確定聚合度為12到19的多聚糖為蜂蜜摻假高果糖玉米糖漿和玉米糖漿的標志物。但是這種方法需要復雜的前處理過程來除去蜂蜜中的葡萄糖、果糖和少量寡糖，導致檢測方法操作復雜。脈沖電流檢測器的高效陰離子交換色譜法(HPAEC-PAD)法的局限性更大，在前期對寡糖和多聚糖的水解很可能造成假陽性結果，因為真蜂蜜中也有聚合度3-6的寡糖的存在。脈沖電流檢測器的高效陰離子交換色譜法(HPAEC-PAD)則需要復雜的前處理過程來除去單糖和寡糖，前處理過程復雜。GC-MS法測定蜂蜜摻假也有一定的缺陷，在檢測前需要對蜂蜜樣本進行衍生化。核磁共振技術(NMR)靈敏度低，對于蜂蜜中我們所關注的代謝物可能會被忽略，并且核磁共振儀器價格昂貴，并不適用于日常監測。近紅外光譜(NIRS)也有其致命的缺點：1.需要大量有代表性且化學值已知的樣品建立模型。這樣，對小批量樣品的分析用近紅外就顯得不實際了。2.模型需要不斷更新，由于儀器狀態改變或標準樣品發生變化，模型也要隨之變化了。3.模型不通用，每臺儀器的模型都不相同，增加使用的局限性。4.建模本錢高，測試用度大。

現有的對蜂蜜品質進行鑒定的方法如GB14963-2011以及SN/T 0852-2012：對蜂蜜的感官性狀；理化指標如：果糖葡萄糖含量，蔗糖含量等方面進行檢測；微生物指標，農殘獸殘，重金屬，添加劑等方面也均進行檢測。很多企業標準則對蜂蜜中的麥芽糖、果葡萄糖漿、可可粉，檸檬酸、誘惑紅、焦糖色、山梨酸鉀、卡拉膠、食用香精等進行測定。目前對蜂蜜摻假的各種糖漿，在理化性質，成分組成和含量以及風味方面與蜂蜜非常相似，因此上述對蜂蜜品質進行測定的方法并不能檢測出糖漿摻假的蜂蜜。