[發明專利]一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201710269527.8
• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN107228833B
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: 段志貴;黃碩泉;陳爽;劉炅峰
• 申請（專利權）人: 東莞微領生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京前審知識產權代理有限公司 11760
• 代理人: 陳姍姍

本公開揭示了一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒及檢測方法，所述試劑盒包括干燥輔助劑、提取劑、水解劑、指示劑、顯色劑和標準品。所述干燥輔助劑為硅藻土或石英砂，所述提取劑為甲醇和乙酸，所述水解劑為鹽酸，所述指示劑為酚酞，所述中和劑為氫氧化鈉，所述顯色劑為3、5?二硝基水楊酸，所述標準品為高純度無患子總皂苷。本公開成本低、靈敏度高、線性范圍寬，兼容性好，保質期長，對環境無危害，操作簡單快捷，非專業人員根據說明書也能很好完成檢測。

技術領域

本公開涉及生物技術檢測領域，尤其涉及一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒及檢測方法。

背景技術

無患子為無患子科，屬喬木，其果實含有大量的皂苷成分可作為制作天然洗滌劑的原材料，因此經濟效益顯著。目前檢測無患子總皂苷的方法主要有液相色譜質譜法、高效液相色譜法和香草醛-高氯酸/濃硫酸法兩種。液相色譜質譜法能準確的測定和定量無患子皂苷，但是所用儀器設備造價昂貴，維護成本高，不易攜帶，所需操作人員的專業水平高，且線性范圍窄，難以廣泛應用于一般的工業快速檢測。液相色譜質譜法高效液相色譜法存在所需設備昂貴、操作要求較高、需要昂貴的標準品等一系列的缺點。香草醛-高氯酸/濃硫酸法是以齊墩果酸為標準品，利用濃硫酸或高氯酸對無患子總皂苷脫水后與香草醛反應顯色，通過對顯色液光密度值得檢測來定量總皂苷；此方法對假果皮或假果皮提取物等來源復雜樣品的兼容性差，顯色溶液的穩定性差，且采用濃硫酸或高氯酸對操作人員和環境的危害性大。因此，現有技術存在設備昂貴、沒有無患子總皂苷標準品、兼容性差和方法危險性大等一系列問題，不太適合無患子皂苷原料或制品的質量控制和工業生產過程中的快速抽檢。

發明內容

基于此，本公開揭示了一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒；

所述試劑盒包括：干燥輔助劑、提取劑、水解劑、指示劑、中和劑、顯色劑和標準品；

所述干燥輔助劑用于輔助液體樣品的干燥；

所述提取劑用于提取固體樣品中的無患子總皂苷；

所述水解劑用于無患子總皂苷的水解；

所述指示劑用于無患子總皂苷水解液的酸堿度指示；

所述中和劑用于中和無患子總皂苷水解液中的鹽酸；

所述顯色劑用于無患子總皂苷水解液的顯色；

所述標準品用于無患子總皂苷定量的標準參照物。

本公開還揭示了一種無患子總皂苷快速檢測方法，所述方法包括以下步驟：

S100、將待測樣品溶液加入到干燥劑中，進行干燥；

S200、向干燥后的待測樣品溶液和干燥劑的混合物或者固體樣品中加入提取劑，充分振蕩溶解后，置于離心機中，得到沉淀和上清液；

S300、取步驟S200中的上清液，加入水解劑，沸水浴至100℃后水解得到水解液；

S400、對所述水解液中加入指示劑；

S500、加入中和劑至溶液顯紅色為止；

S600、加入顯色劑，沸水浴加熱，得到顯色液；

S700、將顯色液定容至5mL-25mL，利用紫外可見光分光光度計在540nm波長下測定顯色液的光密度值；

S800、將無患子總皂苷粉末用提取劑溶解配制成溶液，根據無患子總皂苷的質量，按照等比或者等差數列設定n個遞增的梯度標準樣品，并按照步驟S100-S700完成無患子總皂苷標準品的光密度值的測定；

S900、根據無患子總皂苷標準品的濃度和光密度值的線性關系制作標準曲線，并以其作為參考，利用步驟S700中得到的光密度值計算待測樣品中的無患子總皂苷含量。