[發明專利]一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201710269527.8
• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN107228833B
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: 段志貴;黃碩泉;陳爽;劉炅峰
• 申請（專利權）人: 東莞微領生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京前審知識產權代理有限公司 11760
• 代理人: 陳姍姍

1.一種無患子總皂苷快速檢測試劑盒，所述檢測試劑盒用于檢測無患子果皮、無患子果皮提取液或含無患子皂苷的日化用品中的無患子總皂苷，針對無患子總皂苷含量測定，其特征在于，所述試劑盒包括：干燥輔助劑、提取劑、水解劑、指示劑、中和劑、顯色劑和標準品；

所述干燥輔助劑用于輔助液體樣品的干燥；

所述提取劑用于提取固體樣品中的無患子總皂苷；

所述水解劑用于無患子總皂苷的水解；

所述指示劑用于無患子總皂苷水解液的酸堿度指示；

所述中和劑用于中和無患子總皂苷水解液中的鹽酸；

所述顯色劑用于無患子總皂苷水解液的顯色；

所述標準品用作無患子總皂苷定量時的標準參照物，所述標準品為無患子總皂苷粉末；其中：

所述干燥輔助劑包括硅藻土或石英砂；

所述提取劑包括1∶1-1∶2的甲醇或乙酸溶液；

所述水解劑包括3-6mol/L的鹽酸溶液；

所述指示劑包括0.1-0.5％的酚酞溶液；

所述中和劑包括3-6mol/L的氫氧化鈉溶液；

所述顯色劑包括0.3-1％的3、5-二硝基水楊酸溶液。

2.一種無患子總皂苷快速檢測方法，所述方法采用權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

S100、將待測樣品溶液加入到干燥劑中，進行干燥；

S200、向干燥后的待測樣品溶液和干燥劑的混合物或者固體樣品中加入提取劑，充分振蕩溶解后，置于離心機中，得到沉淀和上清液；

S300、取步驟S200中的上清液，加入水解劑，沸水浴至100℃后水解得到水解液；

S400、對所述水解液中加入指示劑；

S500、加入中和劑至溶液顯紅色為止；

S600、加入顯色劑，沸水浴加熱，得到顯色液；

S700、將顯色液定容至5mL-25mL，利用紫外可見光分光光度計在540nm波長下測定顯色液的光密度值；

S800、將無患子總皂苷粉末用提取劑溶解配制成溶液，根據無患子總皂苷的質量，按照等比或者等差數列設定n個遞增的梯度標準樣品，并按照步驟S100-S700完成無患子總皂苷標準品的光密度值的測定；

S900、根據無患子總皂苷標準品的濃度和光密度值的線性關系制作標準曲線，并以其作為參考，利用步驟S700中得到的光密度值計算待測樣品中的無患子總皂苷含量。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟S100中所述將待測溶液與干燥劑的質量體積比為1∶2-1∶5。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟S200中所述待測樣品溶液和干燥劑的混合物與提取劑的質量體積比為1∶2；所述離心機的轉速為8000-12000rpm，離心時間為5-10分鐘。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟S300中所述上清液和水解劑的體積比為1∶1-1∶3；

沸水浴至100℃后水解的時間為15-25分鐘。

6.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟S400中水解液與指示劑的具體比例為：50mL水解液中加入40-60μL指示劑。

7.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟S600中沸水浴的加熱溫度為100℃，加熱時間為5-10分鐘。