[發明專利]靶向CD19的嵌合抗原受體并聯合表達IL-15的方法和用途

有效

• 申請號: 201710269071.5
• 申請日: 2017-04-24
• 公開（公告）號: CN108728459B
• 公開（公告）日: 2023-08-04
• 發明（設計）人: 黃飛;金濤;王海鷹;何鳳;史子嘯
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C07K19/00;C12N15/867;C12N5/10;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種嵌合抗原受體CD19?CD8HTM?41BB?CD3ζ?mbIL15及其用途，該嵌合抗原受體由鼠抗人CD19單克隆抗體(克隆號FMC63)的重鏈和輕鏈可變區(CD19scFv)、人CD8α鉸鏈區和跨膜區、人41BB胞內區、以及人CD3ζ胞內區和IL15+IL15Rα結構串聯構成。該嵌合抗原受體用于修飾人的T淋巴細胞，修飾后的T細胞(CAR?T細胞)能用于表達CD19陽性急性/慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤的治療。本發明制備的CD19?mbIL15?CAR?T細胞對特異性腫瘤細胞具強烈的殺傷功能。

技術領域

本發明屬于嵌合抗原受體領域，具體涉及CD19的嵌合抗原受體及其用途。

背景技術

嵌合抗原受體(Chimeric?Antigen?Receptor-T?cell，CAR-T)T細胞是指經基因修飾后，能以MHC非限制性方式識別特定目的抗原，并且持續活化擴增的T細胞。2012年國際細胞治療協會年會中指出生物免疫細胞治療已經成為手術、放療、化療外的第四種治療腫瘤的手段，并將成為未來腫瘤治療必選手段。CAR-T細胞回輸治療是當前腫瘤治療中最明確有效的免疫治療形式。大量研究表明，CAR-T細胞可以有效的識別腫瘤抗原，引起特異性的抗腫瘤免疫應答，顯著改善患者的生存狀況。

嵌合抗原受體(CAR)是CAR-T的核心部件，賦予T細胞HLA非依賴的方式識別腫瘤抗原的能力，這使得經過CAR改造的T細胞相較于天然T細胞表面受體TCR能夠識別更廣泛的目標。CAR的基礎設計中包括一個腫瘤相關抗原(tumor-associated?antigen，TAA)結合區(通常來源于單克隆抗體抗原結合區域的scFV段)，一個胞外鉸鏈區，一個跨膜區和一個胞內信號區。目標抗原的選擇對于CAR的特異性、有效性以及基因改造T細胞自身的安全性來講都是關鍵的決定因素(Science.1986.233(4770):p.1318-21.)。

隨著嵌合抗原受體T細胞(Chimeric?Antigen?Receptor-T?cell，CAR-T)技術的不斷發展，目前CAR-T主要可劃分為四代。

第一代CAR-T細胞由胞外結合區-單鏈抗體(single-chain?fragment?variable,scFV)、跨膜區(transmembrane?region,TM)和胞內信號區——免疫受體酪氨酸活化基序(immunoreceptortyrosine-based?activation?motif,ITAM)組成，其中嵌合抗原受體各部分按如下形式連接：scFv-TM-CD3ζ。第一代CAR雖然能夠看到一些特異性的細胞毒性，但2006年對其進行臨床試驗總結的時候卻發現療效差強人意。究其原因是因為第一代CAR-T細胞在病人體內很快就會耗竭，其持久性(persistence)很差，以至于CAR-T細胞還沒有來得及接觸到大量的腫瘤細胞時就已經凋亡了該種CAR-T細胞可以激發抗腫瘤的細胞毒性效應，但是細胞因子分泌比較少，但其在體內的存活期較短不能激發持久的抗腫瘤效應。[ZhangT.et.al.Cancer?Res2007,67(22):11029-11036.]