[發明專利]質粒組合物、DNAPK基因敲除大鼠模型的構建方法及應用有效
| 申請號： | 201710265724.2 | 申請日： | 2017-04-21 |
| 公開（公告）號： | CN108728487B | 公開（公告）日： | 2020-07-14 |
| 發明（設計）人： | 沈月雷;白陽;張美玲;周小飛;姚佳維;蘇幼紅;余巧玲;杜吉超;趙會珍 | 申請（專利權）人： | 北京百奧賽圖基因生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京悅成知識產權代理事務所(普通合伙) 11527 | 代理人： | 高艷麗;樊耀峰 |
| 地址： | 101111 北京市大興區北京市北京經濟*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 質粒 組合 dnapk 基因 大鼠 模型 構建 方法 應用 | ||
1.一種用于引起細胞內基因組結構改變的質粒組合物，其特征在于，所述質粒組合物包含第一質粒和第二質粒，所述第一質粒用于產生第一多肽，所述第二質粒用于產生第二多肽；
其中所述第一多肽能夠特異性識別并結合SEQ ID NO:2所示的序列或其互補序列，所述第二多肽能夠特異性識別并結合SEQ ID NO:3所示的序列或其互補序列；
所述SEQ ID NO:2所示的序列和所述SEQ ID NO:3所示的序列各自為源自大鼠DNAPK基因第4外顯子的序列，所述大鼠DNAPK基因第4外顯子具有SEQ ID NO:1所示的序列；
所述第一質粒的堿基序列如SEQ ID NO:5所示和所述第二質粒的堿基序列如SEQ IDNO:6所示。
2.一種引起細胞內基因組結構改變的方法，其特征在于，所述方法包括使用根據權利要求1所述的質粒組合物的步驟。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法進一步包括使所述第一質粒和所述第二質粒進行體外轉錄得到體外轉錄產物的步驟，還包括使所述體外轉錄產物進行翻譯的步驟。
4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述細胞為受精卵細胞。
5.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述細胞為SD大鼠原核期受精卵。
6.一種DNAPK基因敲除大鼠的構建方法，其特征在于：
所述構建方法包括使用根據權利要求1所述的質粒組合物的步驟；或者
所述構建方法包括以根據權利要求2～5任一項所述的引起細胞內基因組結構改變的方法作為其步驟。
7.根據權利要求6所述的構建方法，其特征在于，所述的構建方法進一步包括如下步驟：
使所述第一質粒和所述第二質粒轉錄產生相應的轉錄產物的步驟；
將所述轉錄產物引入所述大鼠原核期受精卵的細胞質或細胞核中的步驟；和
培養所述受精卵，并將所述受精卵移植進入母鼠的步驟。
8.一種DNAPK基因敲除大鼠在生物醫藥領域中的應用，其特征在于，所述DNAPK基因敲除大鼠通過根據權利要求6或7所述的構建方法構建獲得。
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