[發(fā)明專利]高效液相色譜法檢測AL58805原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質(zhì)的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710264709.6
• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN107037153B
• 公開（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 朱小華
• 申請（專利權(quán)）人: 常州佳德醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/14
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 高桂珍

本發(fā)明涉及高效液相色譜法檢測AL58805原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質(zhì)的方法，針對對甲苯磺酸甲酯(MPTS)和對甲苯磺酸乙酯(EPTS)，先將樣品前處理，再利用高效液相色譜法進行測定：色譜柱為C18色譜柱；檢測波長為225nm；流動相為乙腈?磷酸水溶液；流速為0.8～1.2mL/min；柱溫：30～40℃；進樣量為20μL；洗脫時間為18min；結(jié)果表明，對甲苯磺酸甲酯檢測限為0.3ppm，定量限為1ppm；對甲苯磺酸乙酯檢測限為0.5ppm，定量限為1.4ppm。該方法專屬性強、操作簡單、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確，適用于AL58805中對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯的測定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種AL58805原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質(zhì)的分析方法，特別涉及一種采用高效液相色譜法對AL58805中基因毒性雜質(zhì)對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯進行分離和定量測定的方法。

背景技術(shù)

AL58805是由南京愛德程醫(yī)藥科技有限公司研發(fā)的一類新藥，是在通過計算機輔助藥物設(shè)計技術(shù)篩選得到的一種新型PI3K/mTor雙靶點激酶抑制劑，且具有完全自主知識產(chǎn)權(quán)。前期的研究結(jié)果表明，AL58805是一種優(yōu)秀的抗腫瘤藥物，作用靶點獨特，抗腫瘤作用明顯，毒副作用小，其在胃癌、腎癌、骨肉瘤、結(jié)腸癌裸小鼠移植瘤模型中已被證實有明顯的抗腫瘤活性，因此，開發(fā)成新藥后將在臨床治療腫瘤中具有獨特的優(yōu)勢。

基因毒性雜質(zhì)：在以DNA反應(yīng)物質(zhì)為主要研究對象的體內(nèi)/體外試驗中，發(fā)現(xiàn)它們對DNA有潛在的破壞性。按照目前的法規(guī)來說，(體內(nèi))基因毒性物質(zhì)在任何攝入量水平上對DNA都有潛在的破壞性，這種破壞可能導(dǎo)致腫瘤的產(chǎn)生，所以必須嚴(yán)格控制。

對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯是合成AL58805原料藥時產(chǎn)生的副產(chǎn)物，屬于潛在基因毒性雜質(zhì)。為了嚴(yán)格控制對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯的含量，需尋求一種簡單、快捷、專屬性強、靈敏度高的分析方法顯得猶為重要。

關(guān)于AL58805中對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯含量測定的方法在國內(nèi)外還沒有報道。現(xiàn)今，僅有關(guān)于其它藥物中對甲苯磺酸酯類基因毒雜質(zhì)測定的文獻報道，報道中常用的檢測方法是高效液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用法，如長春西汀中對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯的LC-MS/MS法測定^[1]、LC-MS/MS測定草酸右旋西酞普蘭中對甲苯磺酸酯類基因毒性雜質(zhì)的含量^[2]、HPLC法測定氫溴酸西酞普蘭中的基因毒性雜質(zhì)對甲苯磺酸乙酯^[3]。文獻^[1]和文獻^[2]基因毒性雜質(zhì)的線性范圍及定量限濃度均相似，文獻^[1]中對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯的定量限均為2.5ng/mL(2.5ppm)，線性范圍為2.5～50ng/mL，文獻^[3]中對甲苯磺酸乙酯的定量限為25.6ng/mL(5.12ppm)，線性范圍為25.6～187.5ng/mL。而且，雖然質(zhì)譜檢測器是一種高靈敏度的通用檢測器，然而高昂的價格限制了它的推廣使用。

[1]張薇，陳夷花，鄭楓.長春西汀中對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯的LC-MS/MS法測定[J]，中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2015，46(12)：1334-1336.

[2]梁鍵謀，傅聰，陳悅.LC-MS/MS測定草酸右旋西酞普蘭中對甲苯磺酸酯類基因毒性雜質(zhì)的含量[J]，中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2016，33(11)：1436-1440.

[3]孫樸.HPLC法測定氫溴酸西酞普蘭中的基因毒性雜質(zhì)對甲苯磺酸乙酯[J]，藥學(xué)研究，2015，34(11)：637-639.

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點與不足，本發(fā)明的目的是提供一種高效液相色譜法檢測AL58805原料藥或藥物制劑中基因毒性雜質(zhì)(對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯)的方法。