[發(fā)明專利]一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針的合成及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710263822.2
• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN107033111B
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韓得滿;陳逢灶
• 申請（專利權(quán)）人: 臺州學(xué)院
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;C09K11/06;C09K9/02;G01N21/64
• 代理公司: 臺州藍(lán)天知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33229
• 代理人: 羅佩芝

本發(fā)明屬于分析化學(xué)的熒光探針傳感技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種新型的高選擇性、高靈敏度、可視化檢測硫化氫的近紅外熒光探針的合成方法及應(yīng)用。所述方法包括將乙酰乙酸乙酯和水楊醛反應(yīng)得到前驅(qū)體，接著加入到N,N?二甲基甲酰胺(DMF)和三氯氧磷中，反應(yīng)得到香豆素衍生物，再與丙二腈及催化劑在室溫下反應(yīng)得到上述熒光探針。該探針制備方法簡單，可高選擇性高靈敏度地與硫化氫響應(yīng)，表現(xiàn)為熒光增強，實現(xiàn)可視化檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分析化學(xué)的熒光探針傳感技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種高選擇性、高靈敏度、近紅外、可視化檢測硫化氫的熒光探針的合成及應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著工農(nóng)業(yè)的生產(chǎn)，硫化氫普遍存在于自然界中，過量的硫化氫對環(huán)境的污染極其嚴(yán)重，同時對生物的危害也非常大，可能引起人類各種疾病，如：阿爾茨海默氏癥、糖尿病、慢性肝炎、唐氏綜合征等。因而，發(fā)展一種有效、準(zhǔn)確、便捷地檢測硫化氫的方法顯得尤為重要。

經(jīng)過人們不斷的探索，有許多硫化氫測定的方法被提出并且取得一定的成功。傳統(tǒng)的硫化氫測定方法，比如：硫化銀比色法；亞甲基藍(lán)比色法；乙酸鉛試紙法；庫倫滴定法；離子色譜法等，這些方法被廣發(fā)的應(yīng)用于硫化氫的測定也取得很的大成功，但是它們其中也存在一些缺陷，如：有些儀器測定操作復(fù)雜，成本較貴，另外由于有些含硫化氫的樣品液成分越來越復(fù)雜，有些比色法無法準(zhǔn)確測定硫化氫含量等。克服困難，突破局限，不斷的深入研究，一種新型的熒光探針測定硫化氫的方法展現(xiàn)在人們眼前并不斷的發(fā)展。熒光探針不僅能測定溶液中的硫化氫含量，同時還可應(yīng)用于生物組織或者細(xì)胞中硫化氫的測定，具有十分重要的意義。因此，開發(fā)一種高選擇性、高靈敏度、近紅外、可視化檢測硫化氫的熒光探針不僅具有環(huán)境監(jiān)測的重要意義，而且對一些疾病的臨床診斷具有十分重要的意義。

本發(fā)明涉及一種新型的檢測硫化氫的熒光探針。我們通過香豆素衍生物與丙二腈的反應(yīng)，設(shè)計一種新型的熒光探針。該探針在檢測硫化氫上展現(xiàn)了其高選擇性，高靈敏度，可視化的優(yōu)點。更值得一提的是該探針是一種可雙通道檢測的探針，利用不同的波長激發(fā)與硫化氫響應(yīng)后的探針，在可見光區(qū)和近紅外區(qū)域均有較強的熒光，且在近紅外區(qū)的熒光是探針本身一直存在的熒光，可作為熒光內(nèi)標(biāo)。近紅外熒光在進(jìn)行生物組織或細(xì)胞檢測時對生物機體損傷小。同時，生物組織對近紅外區(qū)熒光的吸收最少，近紅外光可以穿透生物組織的距離大，可以對深層的組織和器官進(jìn)行探測和成像。因此，該探針具有潛在的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高選擇性、高靈敏度、近紅外、可視化檢測硫化氫的熒光探針的合成及該探針的應(yīng)用。

根據(jù)本發(fā)明，所述通過香豆素衍生物與丙二腈反應(yīng)制備熒光探針分子的方法，其合成步驟具體包括：(1)乙酰乙酸乙酯和二乙胺基水楊醛溶解在乙醇中，滴加堿性催化劑，攪拌回流7～14小時。停止反應(yīng)，冷卻至室溫，過濾得到亮黃色沉淀，用冰無水乙醇洗滌一次。無水乙醇重結(jié)晶，得到黃色固體產(chǎn)物7-二乙胺基苯并吡喃酮。(2)在三口燒瓶中，加入DMF溶劑，冷卻攪拌至-5～10℃，恒壓滴液漏斗緩慢滴加POCl₃，再緩慢加入7-二乙胺基苯并吡喃酮，在-5～10℃下攪拌，然后在70-90℃攪拌，停止攪拌，冷卻至室溫，將反應(yīng)液滴加入碎冰中進(jìn)行深度冷卻，用碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH，過濾得到固體，冰水洗滌，真空干燥，柱層析分離提純得到黃色的香豆素衍生物；(3)將上述香豆素衍生物與丙二腈溶于無水乙醇中，滴加堿性催化劑，室溫攪拌，TLC監(jiān)測，反應(yīng)結(jié)束，萃取收集，柱層析分離提純即可得到熒光探針。

與現(xiàn)有技術(shù)相比本專利技術(shù)具有以下優(yōu)點：

1.選擇性好，常見的離子和類似化合物基本不干擾；

2.靈敏度高，檢測限達(dá)13.9nM；

3.合成簡單，檢測方便；

4.近紅外可視化，對生物體損傷小，具有潛在應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1為探針檢測硫化氫的500nm處的熒光滴定圖