[發(fā)明專利]抗Stathmin單克隆抗體及其用途

有效

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• 申請日: 2017-04-21
• 公開（公告）號: CN108727493B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙曉航;孫玉琳;顏露;劉芳;周蘭萍;許楊;韓改凈;牛芳斐
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學科學院腫瘤醫(yī)院
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N5/20;G01N33/574;C12R1/91
• 代理公司: 中國貿(mào)促會專利商標事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 李英

本發(fā)明主要涉及可特異性識別和結(jié)合由STMN1基因編碼的蛋白Stathmin的單克隆抗體(例如本文所述的C3和C16單克隆抗體)，產(chǎn)生所述單克隆抗體的雜交瘤，包含所述單克隆抗體的組合物，以及所述單克隆抗體的使用方法和用途。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫學領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明主要涉及可特異性識別和結(jié)合蛋白Stathmin的單克隆抗體(例如本文所述的C3和C16單克隆抗體)，產(chǎn)生所述單克隆抗體的雜交瘤，包含所述單克隆抗體的組合物，以及所述單克隆抗體的使用方法和用途。

發(fā)明背景

食管鱗狀細胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是我國多發(fā)的消化道惡性腫瘤，其早期癥狀不明顯，診斷時多為中晚期，因此預(yù)后不良。目前，已發(fā)現(xiàn)和可用于食管癌的血清標志物敏感性偏低，文獻報道中靈敏度最高的Cyfra21-1也僅有45.5％，單獨應(yīng)用于食管癌的診斷價值不大。因此，臨床上仍然缺乏食管鱗癌特異的診斷標志物。

本發(fā)明人的前期工作應(yīng)用蛋白質(zhì)組學技術(shù)篩選用于診斷和監(jiān)測的食管鱗癌特異標志物。經(jīng)二維電泳(2DE)分離-基質(zhì)輔助激光解吸離子化飛行時間質(zhì)譜(matrix-assistedlaser desorption/ionization time offlight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS)分析了8對伴隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移ESCC組織的差異蛋白表達譜，提示Stathmin是一種在食管鱗癌中高表達的蛋白。Stathmin(STMN1)是近年來研究較多的一個微管解聚蛋白，通過磷酸化調(diào)節(jié)自身活性從而影響細胞內(nèi)微管系統(tǒng)動力平衡，對細胞周期的變化起著重要作用。研究發(fā)現(xiàn)在多種人類惡性腫瘤中Stathmin過表達，故亦稱為癌蛋白18(Op18)。實驗室前人通過ELISA檢測食管鱗癌患者以及正常人血清Stathmin水平，提示食管鱗癌患者血清中Stathmin濃度升高并與食管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。利用血清Stathmin濃度對食管鱗癌診斷的靈敏度達到93.3％特異性達到86.7％，均顯著優(yōu)于目前已有的食管癌腫瘤標志物， 提示Stathmin可作為食管鱗癌診斷、治療和判斷預(yù)后的一個新的血清標志物，輔助臨床診斷。

然而，市售的Stathmin抗體檢測效果不佳，價格昂貴，工作濃度偏高。因此，仍然存在對效果更好、使用成本更低的優(yōu)質(zhì)Stathmin抗體的需要。

發(fā)明內(nèi)容

在本發(fā)明中，除非另有說明，否則本文中使用的科學和技術(shù)名詞具有本領(lǐng)域技術(shù)人員所通常理解的含義。并且，本文中所用的蛋白質(zhì)和核酸化學、分子生物學、細胞和組織培養(yǎng)、微生物學、免疫學相關(guān)術(shù)語和實驗室操作步驟均為相應(yīng)領(lǐng)域內(nèi)廣泛使用的術(shù)語和常規(guī)步驟。同時，為了更好地理解本發(fā)明，下面提供相關(guān)術(shù)語的定義和解釋。

如本文中所使用的，術(shù)語“Stathmin(STMN-1)”是本領(lǐng)域內(nèi)熟知的，其是由人STMN1基因編碼的微管解聚蛋白。在本申請中，“Stathmin”、“stathmin-1”和“STMN-1”可互換使用。Stathmin通過磷酸化調(diào)節(jié)自身活性從而影響細胞內(nèi)微管系統(tǒng)動力平衡，對細胞周期的變化起著重要作用。Stathmin在多種人類惡性腫瘤包括食管鱗癌中過表達，故其亦被稱為癌蛋白18(Op18)。Stathmin蛋白的示例性編碼核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。