[發(fā)明專利]一種肺炎球菌蛋白疫苗及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710258675.X | 申請日： | 2017-04-19 |
| 公開（公告）號： | CN107929728A | 公開（公告）日： | 2018-04-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 艾智武;袁軍;程超;張凡;吳克 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢博沃生物科技有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/09 | 分類號： | A61K39/09;A61K39/385;A61K39/116;A61P31/04 |
| 代理公司： | 上海精晟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司31253 | 代理人： | 張超宇,馮子玲 |
| 地址： | 430075 湖北省武漢市東湖高新區(qū)*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 肺炎 球菌 蛋白 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種肺炎球菌蛋白疫苗，其特征是：包括一種或多種肺炎鏈球菌莢膜糖與載體蛋白共價(jià)連接而得的肺炎鏈球菌莢膜糖-蛋白結(jié)合物，載體蛋白為凝集素。
2.權(quán)利要求1所述的蛋白疫苗，其特征是：凝集素選自植物凝集素。
3.權(quán)利要求1所述的蛋白疫苗，其特征是：肺炎球菌的血清型包括1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和/或23F。
4.權(quán)利要求1所述的蛋白疫苗，其特征是：肺炎球菌莢膜糖與載體蛋白的質(zhì)量比為(0.5～2)：1。
5.一種肺炎球菌蛋白疫苗的制備方法，其特征是，包括如下步驟：
步驟a)制備并分離提純載體蛋白；
步驟b)分別分離提純多種血清型肺炎球菌莢膜上的莢膜糖；
步驟c)活化步驟b所得莢膜糖，與步驟a所得凝集素共價(jià)偶聯(lián)；
步驟d)分離提純步驟c所得偶連體，得蛋白疫苗原液。
6.權(quán)利要求5所述的蛋白疫苗的制備方法，其特征是，包括如下步驟：
步驟a)制備并分離提純凝集素；
步驟b)分別分離提純多種血清型肺炎球菌莢膜上的莢膜糖；
步驟c)活化步驟b所得莢膜糖，超聲條件下與步驟a所得凝集素共價(jià)偶聯(lián)；
步驟d)分離提純步驟c所得偶連體，得蛋白疫苗原液。
7.權(quán)利要求6所述的蛋白疫苗的制備方法，其特征是，步驟c制備活化的肺炎球菌莢膜糖的具體操作為：步驟b所得莢膜糖中加入生理鹽水，加入CDAP活化3min，再加入等體積ADH溶液反應(yīng)30min，所得溶液經(jīng)超濾濃縮后備用。
8.權(quán)利要求7所述的蛋白疫苗的制備方法，其特征是，步驟c將活化肺炎球菌莢膜糖偶聯(lián)凝集素的具體操作為：超聲條件下，將ADH-莢膜糖衍生物加入生理鹽水，加入EDAC至終濃度為0.1mol/L，室溫下反應(yīng)3小時(shí)，反應(yīng)物用4℃生理鹽水透析膜透析，加入凝集素。
9.權(quán)利要求6所述的蛋白疫苗的制備方法，其特征是：超聲波頻率范圍為15～30kHz。
10.權(quán)利要求6所述的蛋白疫苗的制備方法，步驟d具體操作為：步驟c所得反應(yīng)物經(jīng)5000rpm/min離心2min，取上清液層析，除菌過濾，得蛋白疫苗溶液。
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