[發(fā)明專利]雙酶法制備鈣螯合肽的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710246307.3 | 申請日: | 2017-04-15 |
| 公開(公告)號: | CN107056885A | 公開(公告)日: | 2017-08-18 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 汪少蕓;陳旭;蔡茜茜;徐梁棕;方衛(wèi)東 | 申請(專利權(quán))人: | 福州大學(xué) |
| 主分類號: | C07K5/065 | 分類號: | C07K5/065;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06 |
| 代理公司: | 福州元創(chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司35100 | 代理人: | 蔡學(xué)俊,陳彩芳 |
| 地址: | 350108 福建省福州市*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 法制 備鈣螯合肽 方法 | ||
1.一種鈣螯合肽,其特征在于:所述肽的氨基酸序列為:FY。
2.如權(quán)利要求1所述的一種鈣螯合肽的制備方法,其特征在于:以裂殖壺菌粕蛋白為原料,采用堿性蛋白酶和復(fù)合風(fēng)味蛋白酶對其進行分步酶解,分離純化、冷凍干燥得到鈣螯合肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種鈣螯合肽的制備方法,其特征在于:第一步酶解條件為:酶為堿性蛋白酶,時間為8 h,pH為9,酶底比為10wt.%,底物濃度為1 wt.%;第二步酶解條件為:酶為復(fù)合風(fēng)味蛋白酶,酶底比為10 wt.%,溫度為40 ℃,pH為6,時間為3 h 50 min。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種鈣螯合肽的制備方法,其特征在于:所述分離純化的具體步驟為:酶解產(chǎn)物首先利用Sephadex G-25凝膠過濾色譜進行分離,洗脫液為去離子水,流速為0.3 mL/min,洗脫峰在214 nm下進行測定;收集具有最高鈣螯合活性的峰,利用RP-HPLC-C18反相高效液相色譜再進行進一步分離,反相HPLC的分離條件是用體積分?jǐn)?shù)為0-40%乙腈溶液作為洗脫液梯度洗脫,流速為2 mL/min,收集洗脫峰,冷凍干燥得到所述的具有鈣螯合力的裂殖壺菌粕蛋白肽。
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