[發明專利]一種單萜類化合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201710243681.8
• 申請日: 2017-04-14
• 公開（公告）號: CN107011140B
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發明（設計）人: 李艷紅;黃相中;田凱;楊淬;孫靜賢;釧永明;李蓉
• 申請（專利權）人: 云南民族大學
• 主分類號: C07C45/78
• 分類號: C07C45/78;C07C45/79;C07C49/713;A61P29/00
• 代理公司: 昆明知道專利事務所(特殊普通合伙企業) 53116
• 代理人: 姜開俠;謝喬良

1.一種單萜類化合物的制備方法，所述單萜類化合物分子式為C₁₀H₁₆O₂，命名為4-羥基-4-異丙基-2-甲基-2-環己烯-1-酮，具有以下結構：

；

其特征在于制備方法是以土荊芥葉為原料，經浸膏提取、有機溶劑萃取、硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析、高壓液相色譜分離獲得，具體為：

A、浸膏提取：將土荊芥葉晾干粉碎得到0.1~0.2cm粒徑大小的顆粒，加入土荊芥葉重量5~10倍的體積百分濃度85~100%乙醇溶液于溫度64~74℃下回流提取3~5次，每次1.5~3h，合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至比重為1.1~1.3得到浸膏a；

B、有機溶劑萃取：將浸膏a中加入浸膏a重量3~5倍的水，依次用與水等體積的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶劑進行萃取，每種溶劑萃取5~7次，蒸去溶劑分別得到石油醚萃取物b、乙酸乙酯萃取物c和正丁醇萃取物d；

C、硅膠柱層析：

1）將乙酸乙酯萃取物b上硅膠柱，裝柱硅膠為100~200目，用量為萃取物b重量8~10倍，用體積比為50:1~0:1的氯仿-甲醇有機溶劑梯度洗脫，收集梯度洗脫液、濃縮，經TLC監測，合并相同的部分；

2）將1）中以50:1配比的氯仿-甲醇有機溶劑進行洗脫得到的洗脫液經濃縮至相對密度為1.0~1.3得到濃縮液e，然后上硅膠柱，裝柱硅膠為200~300目，用量為濃縮液e體積8~10倍，用體積比100:1~10:1的氯仿-甲醇有機溶劑洗脫、濃縮，經TLC監測，合并相同的部分；

D、將2）中以50:1配比的氯仿-甲醇有機溶劑進行洗脫得到的洗脫液經濃縮至相對密度為1.0~1.3后分別用Sephadex LH-20柱層析和半制備高效液相色譜儀分離純化，即得所述的單萜類化合物4-羥基-4-異丙基-2-甲基-2-環己烯-1-酮。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于A步驟中所述過濾是經80~120μm的濾紙進行過濾。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于A步驟中所述減壓濃縮是在溫度50℃以下的條件下用旋轉蒸發儀進行減壓濃縮。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于B步驟中所述蒸去溶劑是采用旋轉蒸發儀蒸去溶劑。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于C步驟1）中所述氯仿-甲醇有機溶劑的體積配比為50:1、25:1、20:1、15:1、10:1、7:1、5:1、2:1和0:1。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于C步驟2）中所述氯仿-甲醇有機溶劑的體積配比為100:1、50:1、25:1、20:1、15:1和10:1。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于D步驟中所述分離純化是將2）中以50:1配比的氯仿-甲醇有機溶劑進行洗脫得到的洗脫液濃縮至相對密度1.1~1.3后經SephadexLH-20柱色譜，以甲醇作為流動相純化后，經半制備高效液相色譜，以體積配比為80:20的甲醇-水為流動相，流速2.5ml/min，250×10mm，5μm的C18為固定相，紫外檢測器檢測波長為210nm，每次進樣50μL，收集28~32min的色譜峰，多次累加后蒸干，得到所述的單萜類化合物4-羥基-4-異丙基-2-甲基-2-環己烯-1-酮。