[發明專利]一種含α-胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠及制備方法

有效

• 申請號: 201710239081.4
• 申請日: 2017-04-13
• 公開（公告）號: CN107096509B
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 劉貴林;羅文軍;王玲;楊申永
• 申請（專利權）人: 艾美科健（中國）生物醫藥有限公司
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/28;B01J20/30
• 代理公司: 濟寧匯景知識產權代理事務所(普通合伙) 37254
• 代理人: 張艷贊

本發明公開了一種含α?胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠及制備方法，屬于生物層析分離功能高分子材料技術領域，其特征在于包括葡聚糖水凝膠微球的制備工序和反?2?丁烯酸葡聚糖凝膠制備工序，一種含α?胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠，由含α?胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠的制備方法制備而成，本發明的有益效果是：本發明生產的葡聚糖凝膠適用性強且具有較高的交聯度、較大的比表面，擴散速度快，純化效果高，該反應過程較為溫和，操作簡單，易于實施。

技術領域

本發明屬于生物層析分離功能高分子材料技術領域，更具體地涉及一種含α-胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠及制備方法。

背景技術

在生物下游產品處理的過程中，層析分離具有分離度高、操作簡單等優點，有其它分離手段無法替代的功能，隨著分離理論與分離介質的發展，新型層析介質一直是層析領域研究的熱點之一。

其中交聯葡聚糖是一種聚合物通過物理或者化學交聯形成的三維立體網狀結構，能夠吸收大量的水分而又不能溶解，親水的小分子可以在凝膠中擴散，并且具有良好的生物相容性，層析速度快，單位體積交換量大，且成本低廉，具有良好的生物安全性和生物可降解性。

通過醚化、酯化等多種反應在交聯葡聚糖分子中引入含有--N、--COOH官能團，可以使葡聚糖凝膠具有選擇性吸附與層析，從而使目標產物得到純化。

目前生物工程產生大量的雜蛋白以及酶過濾，純化效率低，洗脫過程復雜；并且現有技術的葡聚糖凝膠對于洗脫液較為單一，吸附能力弱，解附能力差。

尋求一種適用性較強、吸附能力優秀和解析能力較高的葡聚糖凝膠的制備方法已迫在眉睫。

發明內容

為解決上述問題，克服現有技術的不足，本發明提供了一種適用性較強、既能離子交換又能進行大孔吸附的環保綠色吸附劑，能夠有效的解決純化效果不高的問題。

本發明解決上述技術問題的具體技術方案為：含α-胺基丁二酸功能基的交聯葡聚糖凝膠制備方法，其特征在于包括葡聚糖水凝膠微球的制備工序和反-2-丁烯酸葡聚糖凝膠制備工序，

所述的葡聚糖水凝膠微球的制備工序包括：

（1）將葡聚糖固體溶于去離子水中，配成20-50%的葡聚糖水溶液，按照葡聚糖水溶液：硼氫化鈉質量比為100：0.1～100：1，在葡聚糖水溶液加入硼氫化鈉，并充分溶解后得到葡聚糖水相混合體；

（2）按照甲苯溶液：表面活性劑質量比為100：0.01～100：0.2，在甲苯溶液加入表面活性劑，充分溶解并加熱至60℃得到葡聚糖油相混合體；

（3）將上述的葡聚糖水相混合體加入到上述的葡聚糖油相混合體中，充分攪拌1.5h進行乳化反應，得到反相微乳液；

（4）按照環氧氯丙烷：葡聚糖水相混合體的質量比為0.05：100～1：100，在上述反相微乳液中加入交聯劑-環氧氯丙烷，攪拌1-3h后，按照50%NaOH溶液：葡聚糖水相混合體的質量比為1：100～100：5，加入50%NaOH溶液，保溫6-8h，抽濾掉母液，將抽濾得到的珠球用去離子水洗滌至中性，再用少量乙醇沖洗，并通過旋蒸干燥保存，得到葡聚糖凝膠基球；

所述的反-2-丁烯酸葡聚糖凝膠制備包括：

（1）將葡聚糖凝膠基球按質量比1: 8～1: 10分散于NaOH水溶液中，所述NaOH水溶液的pH=9～13，在室溫下攪拌、溶脹0.5h，水浴升溫至60～80℃，加入葡聚糖凝膠基球質量5-8%的環氧氯丙烷，反應3小時，得到反應體系；

（2）往上述反應體系中逐滴加入10%甲胺水溶液，加入量為上述反應體系體積的0.5～1倍，40min內滴完，再反應八小時，抽濾洗滌，得到葡聚糖凝膠；