[發明專利]利用超高效液相色譜?串聯質譜法同時檢測果汁中7種甜味劑的方法

在審

• 申請號: 201710237385.7
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN106990191A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 閆震;聶繼云;李志霞;李靜;沈友明;李海飛;毋永龍;匡立學;程楊;關棣鍇;李明強;徐國鋒
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院果樹研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及一種果汁中甜味劑的檢測方法，屬于食品檢測分析技術領域。

背景技術

近年來，果汁飲料行業作為解決果農賣果難，提高果農收入的重要途徑，在我國得到了迅 猛發展。為了增加其經濟效益，部分生產商向果汁中加入多種甜味劑來改善口感，但加入量的 多少直接影響到消費者的身體健康，所帶來的安全問題也日益凸現，檢測和監控食品中的甜味 劑已成為安全監測部門的重要工作之一。因此，發展一種快速、準確、靈敏的測定果汁中甜味 劑的分析方法對于保障其質量安全十分必要。

目前，關于甜味劑的檢測方法主要分為分光光度法、毛細管電泳法、高效液相色譜法(HPLC)、 離子色譜法和超高效液相色譜串聯質譜法(UPLC-MS/MS)，其中高效液相色譜法最為常用，但由 于其本身所具備的局限性，比如靈敏度低，檢測時間長，分離度差，易受雜質干擾產生假陽性 等，不但加大了實驗操作人員的工作量,而且難以適應多組分同時檢測的需求和發展趨勢。

超高效液相色譜-串聯質譜檢測方法與上述方法相比，具有分離能力強、定性分析結果可靠、 檢出限低、分析時間快、自動化程度高等優點。液質聯用體現了色譜和質譜優勢的互補，將色 譜對復雜樣品的高分離能力與質譜具有高選擇性、高靈敏性及能夠提供相對分子質量與結構信 息的優點結合起來。近年來已有一些采用該方法檢測食品中甜味劑的報道，但是這些報道檢測 參數單一，且大多數針對酒類產品、乳制品和調味品等，果汁中甜蜜素(SC)、糖精鈉(SA)、 安賽蜜(AK)、三氯蔗糖(SL)、阿斯巴甜(ASP)、紐甜(NTM)和甜菊苷(STV)7種甜味劑 的同時檢測尚未見報道。本發明通過對檢測方法的優化，建立了一種簡單、高效、準確，可實 現同時測定果汁中7種甜味劑的UPLC-MS/MS方法，更好的滿足了檢測分析工作的需求和發展趨 勢。

發明內容

為克服現有技術不足，本發明提供利用超高效液相色譜-串聯質譜法同時檢測果汁中7種甜味 劑的方法，旨在為保障食品安全和質量提供技術支持。

本發明技術方案如下：

一種利用超高效液相色譜-串聯質譜法同時檢測果汁中7種甜味劑的方法，包括制備供試樣品 和超高效液相色譜-串聯質譜法檢測。

所述7種甜味劑為甜蜜素(SC)、糖精鈉(SA)、安賽蜜(AK)、三氯蔗糖(SL)、阿斯巴 甜(ASP)、紐甜(NTM)、甜菊苷(STV)。

優選地，制備供試樣品所用提取溶劑為甲醇/水(v:v＝1/1)、乙腈/水(v:v＝1/1)或純水，更 優選為甲醇/水(v:v＝1/1)。

進一步優選地，待測樣品(即果汁)與提取溶劑的體積比例為(0.5-1.5)：(0.5-2)，更優選 為1:1。

優選地，制備供試樣品過程中使用聚醚砜濾膜進行過濾，進一步優選地，聚醚砜濾膜的孔 徑為0.22μm。

具體地，制備供試樣品的方法包括：吸取適量果汁樣品，加入適量提取溶劑[例如甲醇/水 (v:v＝1/1)]，充分搖勻，離心(例如9000r/min離心3min)，吸取上清液過0.22μm聚醚砜濾 膜后，制得供試樣品；待上機檢測。

優選地，色譜條件如下：

色譜柱：HSS T3柱(100mm×2.1mm，1.8μm)；流速0.4mL/min；進樣量5μL。

進一步優選地，色譜柱溫度為30-45℃，例如30℃、35℃、40℃和45℃；更優選為40℃。

進一步優選地，流動相為甲醇-水。

電噴霧(ESI)離子源；負離子模式；MRM(多反應監測)；離子源溫度150℃；去溶劑氣 溫度400℃；去溶劑氣和錐孔氣均為高純氮氣，流速分別為800L/h和50L/h；碰撞氣(高純氬氣) 流速0.14mL/min。

7種待測物甜味劑優化的質譜參數見下表：

7種甜味劑的質譜參數

注：*為定量離子

Retention time指保留時間，Parent ion指母離子，Daughter ions指子離子，Cone指錐孔電壓，Collision energy指碰撞能量，下同。