[發明專利]一種環肽化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710235924.3
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN107141335B
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 孫晴鎂;丁立建;何山;姚佳曉;斯拉瓦·愛潑斯坦
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07K5/12
• 分類號: C07K5/12;C12P21/04;A61K38/07;A61K38/12;A61P3/04;A61P3/10;C12R1/645
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 何仲

1.一種環肽化合物，其特征在于含有1個亮氨酸殘基、2個N甲基亮氨酸殘基和一個苯丙氨酸殘基構成的環四肽化合物，其結構式如(I)所示：

2.一種根據權利要求1所述的環肽化合物的制備方法，其特征在于具體包括如下步驟：

(1)發酵生產和浸膏的獲取

將保藏編號為CCTCC NO：M2014098的球孢枝孢菌YS3-1-5(Cladosporiumsphaerospermum YS3-1-5)菌落接種到裝有液體培養基的錐形瓶中，于28℃、180r/min搖床培養10天，獲得發酵液，發酵液用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液減壓濃縮蒸干，獲得粗浸膏，其中所述的液體培養基配制方法如下：將甘露醇10.0g，酵母膏3.0g，麥芽糖20.0g，味精10.0g，葡萄糖20.0g，KH₂PO₄ 0.5g和MgSO₄ 0.3g，溶于1L海水中，于121℃高壓滅菌20min即可；

(2)分離精制

將上述粗浸膏用二氯甲烷和甲醇混合溶劑溶解后，加粗浸膏2倍體積的200-300目硅膠拌樣，通過減壓硅膠柱層析，以石油醚/乙酸乙酯為溶劑進行梯度洗脫，將獲得的洗脫物再經Sephadex LH-20凝膠柱層析以二氯甲烷和甲醇混合溶劑為洗脫劑進行洗脫，所得洗脫液再經反相制備HPLC分離純化，以甲醇/水為流動相進行分離純化得到環肽化合物，其結構如式(I)所示：

其中所述的二氯甲烷和甲醇混合溶劑中二氯甲烷與甲醇的體積比為1：1，所述的減壓硅膠柱的大小為高20cm和直徑4cm，所述的石油醚/乙酸乙酯中石油醚與乙酸乙酯的體積比為8:1至5：1，所述的制備反相高效液相色譜的洗脫劑為甲醇與水按體積比90:10的比例混合。

3.一種權利要求1所述的環肽化合物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑方面的用途。

4.一種權利要求1所述的環肽化合物在制備治療糖尿病、肥胖癥藥方面的用途。