[發(fā)明專利]唐棣的組織培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710233670.1
• 申請日: 2017-04-11
• 公開（公告）號: CN106962194A
• 公開（公告）日: 2017-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 田英姿
• 申請（專利權(quán)）人: 烏魯木齊天格爾農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 烏魯木齊合縱專利商標(biāo)事務(wù)所65105
• 代理人: 褚志武,周星瑩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物培育技術(shù)領(lǐng)域，是一種唐棣的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

榿葉唐棣(Amelanchier alnifolia)是薔薇科唐棣屬一種落葉小喬木或灌木。榿葉唐棣樹形為圓形叢狀，樹皮褐黑色，小枝粗壯細(xì)長，紫褐色。果實中含糖11％至21％，含蛋白質(zhì)1.9％至9.7％。每100g鮮果中，含鎂400mg、含鉀300mg、含原花青素168mg、含鈣102mg、含鐵79mg、含鋅3.28mg，并且還含鈉、錳、胡蘿卜素等微量元素，富含18種氨基酸。榿葉唐棣的葉、莖和果實中含茶多酚。果實中含有矢車菊花色素苷、槲皮素源性黃酮醇苷和綠原酸的衍生物。葉子中含有槲皮素和山柰酚衍生的黃酮苷、兒茶素、新木脂素和羥基肉桂酸。莖中主要含黃酮類、兒茶素和苯甲酸衍生物。榿葉唐棣的莖和葉子中含有原花青素、3％的干漿果生物量和10％至14％干物質(zhì)質(zhì)量，此外，榿葉唐棣種子中含有苦杏仁苷、種子油。

唐棣樹種由國家林業(yè)局“948”項目自加拿大引進，榿葉唐棣是重要的兼顧生態(tài)效益的經(jīng)濟林樹種，具有耐寒耐旱和抗逆性強的特點以及較高的種植效益，是目前國際上發(fā)展速度最快的第三代新型水果之一，具有廣闊的市場前景，正在日益受到政府、社會和商業(yè)資本的關(guān)注和親睞。

但現(xiàn)有唐棣的培育方法存在培育時間長、生根率低、根數(shù)少且短，嚴(yán)重影響了唐棣種苗的繁殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，已不能滿足唐棣種苗規(guī)模化生產(chǎn)的要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種唐棣的組織培養(yǎng)方法，克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，其能有效解決現(xiàn)有唐棣的培育方法存在培育時間長、生根率低和根數(shù)少且短，嚴(yán)重影響了唐棣種苗的繁殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，已不能滿足唐棣種苗規(guī)模化生產(chǎn)要求的問題。

本發(fā)明的技術(shù)方案是通過以下措施來實現(xiàn)的：一種唐棣的組織培養(yǎng)方法，按下述步驟進行：

第一步，唐棣無菌苗的培養(yǎng)，將唐棣種子用水沖洗干凈，先用乙醇水溶液浸泡，乙醇水溶液浸泡后用無菌水沖洗，無菌水沖洗后再用HgCl₂水溶液浸泡，HgCl₂水溶液浸泡后用無菌水沖洗，最后將唐棣種子表面的水漬吸干后接種于MS培養(yǎng)基上，在溫度為22℃至26℃、光照強度為1500Lx至2000Lx、每天光照12h至14h進行培養(yǎng)，培養(yǎng)2d至3d后種子發(fā)芽，培養(yǎng)10d后得到唐棣無菌苗；

第二步，愈傷組織誘導(dǎo)，選取唐棣無菌苗的莖尖、莖段和葉片分別作為誘導(dǎo)愈傷組織，將莖尖和莖段切成小段，無菌苗的葉片切成小片，然后將切成小段的莖尖和莖段與切成小片的葉片消毒后，得到消毒后的愈傷組織；

第三步，唐棣叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，將消毒后的愈傷組織接種到培養(yǎng)基中，在溫度為23℃至26℃、光照強度為1400Lx至2000Lx、每天光照12h至14h進行培養(yǎng)，培養(yǎng)18d至22d后，分化獲得唐棣叢生芽；

第四步，唐棣無菌苗生根培養(yǎng)，將唐棣叢生芽切成單芽后置于裝有1/2MS生根培養(yǎng)基的瓶中，在溫度為23℃至26℃、光照強度為1400Lx至2000Lx、每天光照12h至14h進行培養(yǎng)，培養(yǎng)18d至22d后，得到唐棣帶根苗；

第五步，煉苗與移栽，將得到的唐棣帶根苗在室溫下打開瓶蓋，在瓶中加入少量自來水，煉苗2d至4d，待表面角質(zhì)形成后將唐棣帶根苗取出，用自來水洗凈根部，洗凈根部后移栽到基質(zhì)中并澆透水，培養(yǎng)28d至35d后移栽至大田。

下面是對上述發(fā)明技術(shù)方案的進一步優(yōu)化或/和改進：

上述第一步中，唐棣種子為籽粒飽滿、大小一致的種子；或/和，第一步中，用自來水將唐棣種子沖洗干凈。

上述第一步中，沖洗干凈后的唐棣種子先用體積百分比為70％的乙醇水溶液浸泡3min至6min，用無菌水沖洗2次至3次，再用質(zhì)量百分比為0.1％的HgCl₂水溶液浸泡8min至10min，浸泡后用無菌水沖洗4次至5次，最后用已滅菌的濾紙吸掉唐棣種子表面的水漬后接種于MS培養(yǎng)基上。

上述第二步中，莖尖和莖段切成長為0.5cm至0.7cm的小段，無菌苗的葉片切成0.3cm×0.3cm的小片，然后將切成小段的莖尖和莖段與切成小片的葉片用體積百分比為70％的乙醇水溶液浸泡13s至17s進行消毒。