[發明專利]一種體外快速檢測胱抑素C的試紙條的制備方法

在審

• 申請號: 201710233363.3
• 申請日: 2017-04-11
• 公開（公告）號: CN113466460A
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發明（設計）人: 高玉珍;方敏敏;房鋼;閆華省
• 申請（專利權）人: 上海方恩醫療用品有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 高姍

本發明屬于檢測試紙條技術領域，具體涉及一種體外快速檢測胱抑素C的試紙條的制備方法，所述方法為首先制備免疫金，然后使免疫金與胱抑素C單克隆抗體形成免疫金復合物，再制備免疫層析試紙條。本發明方法制備的試紙條的檢測樣本是尿液，可以快速診斷胱抑素C，在診斷慢性腎病上，具有突破性的、重要的臨床診斷意義。

技術領域

本發明屬于檢測試紙條技術領域，具體涉及一種體外快速檢測胱抑素C的試紙條的制備方法。

背景技術

腎損害是糖尿病、高血壓患者的并發癥之一。腎損害會生成慢性腎病。

慢性腎病(Chronic Kidney Disease，CKD)是威脅人類健康的重大疾病之一，中國是CKD的高發地區，目前約有2.5億成人患者，成人發病率已超過20％，并呈逐年上升趨勢。由于早期癥狀不明顯，不易引起重視，CKD存在知曉率低、發現晚等現象。

隨著CKD的發展逐漸加重并伴隨其它并發癥的出現，醫療支出也隨之大大增加，往往給患者家庭帶來沉重的經濟負擔。如能實現盡早診斷，及早治療，將有效減少或延緩終末期腎病(End stage renal disease，ESRD)的發生，同時顯著減少慢性腎病和心血管疾病所導致的死亡數和殘疾數，減輕醫療負擔。

腎臟疾病被喻為“沉默的殺手”，早期基本沒有癥狀，只有通過早期檢測來發現和控制疾病的發展。對糖尿病、高血壓或是有腎衰竭家族史的高危人群而言，由于所患疾病會對腎臟帶來損傷，增加CKD患病風險，因此更應定期接受慢性腎病檢查。

腎臟疾病檢測的標志物，目前主要通過兩種方法。

一種是用尿中查出的尿白蛋白作為腎臟損傷的標志物，尿白蛋白是在血液中發現的一種蛋白，健康的腎臟不會把白蛋白傳遞至尿液中。受損的腎臟會把部分白蛋白傳遞至尿液。尿液中的白蛋白含量越少越好。當尿白蛋白結果3030mg/24h表示可能有腎病。

另一種是用“血肌酐”標志物測定腎小球濾過率(GlomerularFiltration Rate，GFR)，用于衡量腎臟是否能正常過濾血液。

GFR≥60為人體正常范圍，GFR60時提示可能有腎病，GFR≤15時提示可能有腎衰。

但是，以上二種檢測方法都存在局限性。在CKD的1期和2期，GFR開始緩慢下降，但還無法檢測出蛋白尿。只有在腎臟已經出現嚴重受損的3期至5期，才能檢測出蛋白尿。因此，僅采用蛋白尿標志物很難檢測出1期和2期腎臟疾病。

目前臨床最常用的GFR檢測指標為血肌酐，但敏感度不高。只有當大約50％的腎功能喪失后，血清肌酐才會有顯著上升。在GFR緩慢下降的CKD前期，通過肌酐很難檢測出腎功能衰退，因此被標記為“肌酐盲區”。

此外，肌酐水平極大程度上受到人體肌肉質量影響，與肌肉代謝直接相關，且在不同年齡性別人群中的表達也存在差異。男性體內的肌酐含量高于女性，兒童時期的肌酐水平隨年齡增加，而老年人隨著肌肉含量的下降，根據肌酐的水平會出現高估腎功能的狀況。

肌酐水平也可能受到膽紅素、透析、血糖和藥物等因素影響。因此，僅通過肌酐檢測計算出的GFR靈敏度、準確性有限，尤其在CKD早期不能有效反映GFR的下降情況。

另外，目前醫院檢測血肌酐的樣本是血清，需要抽取檢查者的血液，方法上費時且是創傷性的。

1983年，研究人員首次在雞蛋清中分離純化出半胱氨酸蛋白酶抑制劑(CysteineProteinase Inhibitor，CPI)，后命名為胱抑素C(Cystatin C，Cys C)。作為一種低分子量的堿性非糖化蛋白質，胱抑素C是在人體內以恒定速度產生，并存在于各種體液之中，能自由從腎小球濾過，在近曲小管能全部被吸收，且吸收后被完全降解，不再進入血循環。無組織特異性(包括腎、肝、胰、腸、胃、肺及胎盤等)。

胱抑素C(Cys C)代謝特點：