[發(fā)明專利]海洋微生物脂肪酶YS2071的固定化方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710228123.4 | 申請日： | 2017-04-10 |
| 公開（公告）號： | CN108690842A | 公開（公告）日： | 2018-10-23 |
| 發(fā)明（設計）人： | 王躍軍;孫晶晶;劉均忠;郝建華;馬子賓;孫謐 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國水產(chǎn)科學研究院黃海水產(chǎn)研究所 |
| 主分類號： | C12N11/08 | 分類號： | C12N11/08;C12N9/20 |
| 代理公司： | 北京方安思達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11472 | 代理人： | 陳琳琳;武玥 |
| 地址： | 266071 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 固定化 固定化脂肪酶 脂肪酶 海洋微生物 環(huán)氧樹脂 低溫脂肪酶 固定化載體 生物催化劑 獨特特點 共價連接 能源領域 油脂工業(yè) 洗滌劑 醫(yī)藥工業(yè) 酶活 吸附 配制 保留 應用 | ||
1.一種海洋微生物脂肪酶YS2071的固定化方法,包括下列步驟：
1)、配制海洋微生物低溫脂肪酶YS2071酶液
將海洋微生物低溫脂肪酶YS2071酶粉，溶于0.02mol/L由磷酸氫二鉀4.76g，磷酸二氫鉀0.55g，加入去離子水溶解，定容到1L配制的緩沖液中，4℃下攪拌均勻后，8000r/min高速離心5min，將上清轉(zhuǎn)移到容量瓶中，用上述緩沖液定溶后，得到海洋微生物脂肪酶YS2071酶液，其中,脂肪酶的活性為486U/g，脂肪酶的濃度為2mg/mL，4℃；
2)、固定化載體環(huán)氧樹脂的處理
取固定化載體環(huán)氧樹脂先用95wt％的乙醇浸泡24h后抽濾,用去離子水洗凈乙醇，再用丙酮浸泡12h后，用去離子水洗凈至中性；
3)、脂肪酶YS2071的固定化
將步驟2處理的固定化載體環(huán)氧樹脂與步驟1海洋微生物低溫脂肪酶YS2071的酶液混合，其中，脂肪酶的活性為486U/g,脂肪酶的濃度為2mg/mL，脂肪酶的加酶量為8mg/g，25℃，180rpm作用12h，抽濾，并用0.1M pH 8.0由磷酸氫二鉀23.8g，磷酸二氫鉀2.75g，加入去離子水溶解，定容到1L的磷酸鹽緩沖液洗三次，去除多余的脂肪酶溶液，冷凍干燥得到環(huán)氧樹脂載體固定化海洋微生物低溫脂肪酶YS2071。
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