[發明專利]一種細胞擴增的方法在審
| 申請號： | 201710227450.8 | 申請日： | 2017-04-10 |
| 公開（公告）號： | CN107151655A | 公開（公告）日： | 2017-09-12 |
| 發明（設計）人： | 張斌;李猛;陳虎;趙龍 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第三O七醫院 |
| 主分類號： | C12N5/0789 | 分類號： | C12N5/0789;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京市振邦律師事務所11389 | 代理人： | 汪妍瑜 |
| 地址： | 100071*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞 擴增 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種造血干細胞體外培養方法，其特征在于采用UM171及間充質干細胞聯合培養，包括如下步驟：
1)培養間充質干細胞并傳代；
2)加入UM171及間充質干細胞聯合培養基。
2.如權利要求1所述的培養方法，其特征在于還包括步驟3)用60Co照射，總劑量為5-15Gy。
3.如權利要求2所述的培養方法，其特征在于還包括步驟4)除去步驟2)的培養基并用無血清培養基培養。
4.如權利要求1-3之一所述的培養方法，其特征在于UM171的濃度為100ng/ml。
5.如權利要求1-3之一所述的培養方法，其特征在于細胞培養時間為2周以內。
6.如權利要求1-3之一所述的培養方法，其特征在于步驟1)中間充質干細胞培養方法為：貼壁培養48h后去除未貼壁細胞繼續培養，間隔3～4天換液1次。待細胞90％融合后，0.25％胰蛋白酶消化并傳代，3次傳代以1×105/孔濃度加入培養器皿中。
7.如權利要求3所述的培養方法，其特征在于步驟4)中無血清培養基中添加100ng/ml SCF，100ng/mlFLT3，50ng/ml TPO，按5×104/孔密度接種分選的CD34+細胞，置于37℃5％CO2培養箱培養10天，間隔3～4天換液。
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