[發(fā)明專利]一種雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留量測定的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710226235.6
• 申請日: 2017-04-08
• 公開（公告）號: CN107037149B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭宏斌;楊春亮;葉劍芝;林玲
• 申請（專利權(quán)）人: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/12;G01N30/34
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司 44228
• 代理人: 李慧

1.一種雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留量測定的方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)樣品制備：將雞蛋樣品絞碎、勻漿，冷凍保存；

(2)樣品前處理：準(zhǔn)確稱取經(jīng)步驟(1)勻漿均勻的雞蛋樣品2g，置于50mL聚丙烯離心管中，加入5mL乙腈作為粗提取液，均質(zhì)1min后，振蕩10min，在4℃，以8000r/min離心，提取上清液于雞心瓶中，得提取液；沉淀物用5mL乙腈重復(fù)提取1次，合并兩次提取液，加入2mL異丙醇，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀50℃濃縮至近干，得濃縮液；濃縮液中加入2.0mL甲醇+與二氯甲烷的混合溶液溶解殘渣，混勻，得待凈化溶液；將固相萃取柱依次用5mL的甲醇、5mL甲醇+二氯甲烷的混合溶液預(yù)淋洗、條件化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)固相萃取柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液，用15mL刻度離心管接收洗脫液，用5mL的甲醇+二氯甲烷的混合溶液沖洗燒杯后，洗脫固相萃取柱，并重復(fù)一次；將盛有10mL洗脫液的刻度離心管置于氮吹儀上，在水浴溫度50℃條件下，氮?dú)獯蹈桑靡译?超純水的混合溶液定容至1.0mL，在旋渦混合器上混勻，經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜過濾，供高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定；所述甲醇+二氯甲烷的混合溶液中甲醇與二氯甲烷體積比為1：99；所述乙腈+超純水的混合溶液中乙腈與超純水體積比為1：1；

步驟(2)所述固相萃取柱為自制的中性氧化鋁柱，是以中性氧化鋁粉末為固相萃取填料，固相萃取柱中，中性氧化鋁粉末的加入量為每克樣品加入1克中性氧化鋁粉末；所述中性氧化鋁粉末在使用前，于馬弗爐內(nèi)400℃下烘干；

(3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：混合標(biāo)準(zhǔn)工作液用乙腈稀釋，配制成具有系列梯度濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，以乙腈+超純水混合溶液定容；所述乙腈+超純水的混合溶液中乙腈與超純水體積比為1：1；

(4)高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定：將工作液注入配有三重四級桿的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀儀器中，進(jìn)行超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定；超高效液相色譜測定條件如下：UPLC ACQUITY BEHC18柱，50×2.1mm，1.7μm；流動相A為乙腈，流動相B為5mmol/L的乙酸銨溶液；流速：0.3mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：10μL；所采用的流動相梯度及時間條件如下：流動時間：0min、0.50min、3.00min、3.10min、5.00min，流動相梯度依次是，流動相A：20％、20％、80％、20％、20％，流動相B：80％、80％、20％、80％、80％；質(zhì)譜條件如下：離子源：ESI，負(fù)離子模式；毛細(xì)管電壓：4.0kv；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度350℃；脫溶劑氣流量：800L/hr；錐孔反吹氣流量50L/hr；錐孔電壓：40v；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；其中，所采用的監(jiān)測離子對、錐孔電壓和碰撞能量條件具體如下：

a.氟蟲腈：母離子434.8，定量碎片離子250.0，錐孔電壓-35v，碰撞能量-25v；母離子434.8，子離子330.0，錐孔電壓-35，碰撞能量-15v；

b.氟甲腈：母離子386.9，定量碎片離子351.0，錐孔電壓-30v，碰撞能量-15v；母離子386.9，子離子282.0，錐孔電壓-30v，碰撞能量-30v；

c.氟蟲腈砜：母離子450.9，定量碎片離子282.0，錐孔電壓-35v，碰撞能量-25v；母離子450.9，子離子415.0，錐孔電壓-35v，碰撞能量-15v；

d.氟蟲腈亞砜：母離子418.9，定量碎片離子262.0，錐孔電壓-30v，碰撞能量-25v；母離子418.9，子離子314.0，錐孔電壓-30v，碰撞能量-20v；

(5)殘留量測定結(jié)果的計算：以保留時間對氟蟲腈、氟甲腈、氟蟲腈砜、氟蟲腈亞砜四種農(nóng)藥進(jìn)行定性分析，以峰面積進(jìn)行四種農(nóng)藥的定量分析，用外標(biāo)法計算結(jié)果。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留量測定的方法，其特征在于：所述雞蛋樣品粗提取液為乙腈，提取體積10mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留量測定的方法，其特征在于：步驟(3)所述具有系列梯度濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液其濃度分別為1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL和50.0ng/mL。