[發明專利]高產手性D-(-)-乙偶姻的谷氨酸棒桿菌菌株及構建及應用

有效

• 申請號: 201710215459.7
• 申請日: 2017-04-03
• 公開（公告）號: CN106868033B
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 陳濤;陶然;付晶;毛雨豐;黃燦;王智文;趙學明
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C12N15/77
• 分類號: C12N15/77;C12N1/21;C12P7/26;C12R1/15
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

1.一種高產手性D-(-)-乙偶姻的谷氨酸棒桿菌菌株構建方法，其特征是包括如下步驟：

(1)在谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum)ATCC 13032中敲除副產物乳酸生成途徑ldh基因，副產物乙酸生成途徑pta-ack基因操縱子，副產物甘油生成途徑nagD基因和消耗乙偶姻生成2,3-丁二醇途徑的butA基因；在染色體上的乙酸生成pta-ack位點，插入P_tuf強啟動子過表達的合成支路alsSD操縱子；

(2)用大腸桿菌-谷氨酸棒桿菌穿梭載體pEC-XK99E連接合成支路alsSD操縱子得到pEC-XK99E-alsSD質粒，通過PCR手段刪除pEC-XK99E-alsSD質粒的lacIq區域,得到pEC-XK99E-SD-△lacIq質粒，將所述pEC-XK99E-SD-△lacIq質粒導入到步驟(1)獲得的谷氨酸棒桿菌中，得到高產手性D-(-)-乙偶姻的谷氨酸棒桿菌菌株。

2.權利要求1的方法構建的高產手性D-(-)-乙偶姻的谷氨酸棒桿菌菌株。

3.權利要求2的菌株在生產乙偶姻中的應用。