[發明專利]一種能在常溫下對氨基酸有效拆分的手性冠醚柱

在審

• 申請號: 201710213132.6
• 申請日: 2017-04-01
• 公開（公告）號: CN106984064A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 袁黎明;吳玉萍;謝生明;章俊輝
• 申請（專利權）人: 云南師范大學
• 主分類號: B01D15/20
• 分類號: B01D15/20;B01D15/38;C07C227/34;C07C229/08;C07C229/22;C07D233/64
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙)53108
• 代理人: 謝嘉,龍燕

技術領域

本發明屬于色譜分離柱技術領域，具體是涉及一種能在常溫下對氨基酸進行有效分離的R-(3,3'-氯基-1,1'-二萘基)-20-冠-6高效液相色譜手性冠醚柱。

背景技術

手性化合物的研究現在已成為立體化學研究中最主要、最活躍的領域，手性化合物的拆分是手性化合物研究的基礎。近些年來，手性化合物的拆分取得了比較大的進展。特別是在色譜手性固定相方面，其中高效液相色譜具有分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣等優點，在生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域得到廣泛應用。目前專門用于氨基酸手性拆分的高效液相色譜存在著對混合氨基酸的手性拆分效果不好，對部分單個氨基酸進行手性拆分時溫度條件較為苛刻等缺陷，不利于日常應用。因此，研發一種新的高效液相色譜手性分離柱，實現在常溫條件下對氨基酸的有效拆分，就成為亟待解決的技術問題，但現有技術中尚未見有很好的解決辦法。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種以R-(3,3'-氯基-1,1'-二萘基)-20-冠-6制備的高效液相色譜手性冠醚柱，實現在常溫條件下對20種氨基酸進行有效的拆分。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現。

除非另有說明，本發明所采用的百分數均為質量百分數。

一種能在常溫下對氨基酸有效拆分的手性冠醚柱，先合成R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6冠醚，并通過物理涂敷的方法將冠醚涂敷在C18表面，再進一步制備成高效液相色譜手性冠醚柱。

所述的能在常溫下對氨基酸有效拆分的手性冠醚柱，具體由以下方法制備得到：

(1)R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6的合成：

在N₂保護下，在圓底燒瓶中加入150ml丙酮，再加入8g R‐聯萘酚，20g碳酸鉀，加熱到70℃，緩慢滴加5.1mL碘甲烷，回流12h后TCL檢測，減壓旋蒸除去溶劑，用蒸餾水和二氯甲烷萃取，用無水NaSO₄固體干燥、過濾后，減壓除去溶劑，殘留物經硅膠柱純化過柱，洗脫劑為丙酮:石油醚＝1:40，得到白色晶體B；

在N₂保護下，將4g白色晶體B溶解到150mL乙醚溶液中，再加入32.1mL的正丁基鋰和5.6mL的四甲基二乙胺，在25℃下攪拌8h，將反應物冷卻到‐78℃，將8g六氯乙烷溶解在20mL正戊烷溶液中，在15min內加入到反應液中，攪拌1h后將反應物緩慢升溫到25℃攪拌12h；加入160mL飽和Na₂SO₃溶液攪拌除去多余的液溴；混合物用二氯甲烷和蒸餾水萃取，有機相用無水Na₂SO₄干燥和蒸發，用硅膠柱純化，洗脫劑為丙酮:石油醚＝1:20，得白色晶體C；

取4g白色晶體C溶解于150ml無水二氯甲烷中，在0℃下緩慢加入4ml的BBr₃，緩慢升至25℃，反應24h后降到0℃，加入蒸餾水除去多余BBr₃，用二氯甲烷和水萃取，無水MgSO₄干燥有機層硅膠柱色譜純化，洗脫劑為丙酮:石油醚＝1:10，得到白色化合物D；

在氮氣保護下，將2g白色化合物D溶解到200ml無水四氫呋喃THF中，加入2.5g五甘醇對甲苯磺酸酯和0.24g KOH，在60℃磁力均勻攪拌下回流72h，TCL檢測，用二氯甲烷和蒸餾水多次萃取，用無水MgSO₄干燥有機層并用硅膠柱純化，洗脫劑為丙酮:石油醚＝1:1，得到淡黃色粘稠液體，即為所需的R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6冠醚。

(2)手性冠醚的涂敷：

取0.3g冠醚溶解于15mL的二氯甲烷中，得冠醚溶液；稱取2g 5μm的C18硅膠裝在25mL圓底燒瓶中，用物理涂敷方法將所得冠醚溶液涂敷在C18硅膠上，旋轉蒸發除去有機溶劑DMC，得到R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6手性冠醚固定相；

(3)手性色譜柱的填裝：

取所得R‐(3,3'‐氯基‐1,1'‐二萘基)‐20‐冠‐6手性冠醚固定相1.5g和25mL甲醇水溶液攪拌形成懸浮液，甲醇與水的體積比＝1：10；過篩板250目待用，蒸餾水作流動相頂替液，在40MPa壓力下裝填，即得到所需的手性冠醚柱。