[發(fā)明專利]一種娃娃菜花青素提取方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710210807.1
• 申請(qǐng)日: 2017-03-31
• 公開（公告）號(hào): CN107089964A
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜飛復(fù)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 啟東市清清蔬果農(nóng)地股份專業(yè)合作社
• 主分類號(hào): C07D311/62
• 分類號(hào): C07D311/62;A23L33/105
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及一種花青素分離純化方法，具體涉及一種以水為溶劑的娃娃菜花青素提取方法。

【背景技術(shù)】

植物源花青素是重要天然功能性食品添加劑，廣泛應(yīng)用于飲料、糖果、糕點(diǎn)、酒類及休閑食品等行業(yè)，而且也可用于醫(yī)療保健品及兒童食品等特殊食品的生產(chǎn)。天然植物花青素的研究與開發(fā)方興未艾，其中天然花青素功能成分分離、純化及其生物學(xué)活性研究已成為功能食品研究重要領(lǐng)域。

娃娃菜屬十字花科(cruciferae)蕓薹屬，又名卷心菜、包菜等，原產(chǎn)歐洲地中海地區(qū)。娃娃菜作為一種食用性蔬菜，在我國(guó)已有一百多年的種植歷史，大部分省區(qū)均有栽培，產(chǎn)量?jī)H次于白包菜。由于娃娃菜具有耐寒，來源豐富，價(jià)格低廉，花青素含量高等優(yōu)點(diǎn)，因此，以娃娃菜為原料分離、純化花青素具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值和良好的產(chǎn)業(yè)化前景。

從化學(xué)結(jié)構(gòu)上講，娃娃菜花青素屬于花色苷類物質(zhì)，具有重要的生理活性功能。科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，花色苷類物質(zhì)可以清除體內(nèi)自由基，具有抗氧化、抗衰老、改善視力、抑制腫瘤等功能。娃娃菜花青素易溶于水，安全無毒，是一種新型天然花青素，可以作為重要功能性食品添加劑開發(fā)。然而，目前國(guó)內(nèi)外娃娃菜花青素僅限于采用有機(jī)溶劑提取，花青素的純度低。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供了一種能夠獲得高純度娃娃菜花青素的娃娃菜花青素提取方法。

針對(duì)上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出了如下的技術(shù)方案：

1)將成熟娃娃菜經(jīng)清洗泥沙、去除根部、去除病蟲害及殘次包葉后切碎，將切碎的娃娃菜與水按1∶5的質(zhì)量比混合并置于打漿機(jī)中打成漿液，漿液用震動(dòng)篩粗濾并收集濾液，調(diào)節(jié)濾液的pH值為3.0-4.5；

2)按100g娃娃菜∶0.002-0.003ml的比例向?yàn)V液中加入復(fù)合果膠酶進(jìn)行酶解澄清，將酶解澄清后的濾液以4000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，離心后所得上清液即花青素清液；

3)將花青素清液上大孔吸附樹脂柱進(jìn)行花青素吸附，吸附完成后用乙醇溶液解吸花青素得洗脫液，將洗脫液真空濃縮并回收乙醇，濃縮后的洗脫液經(jīng)冷凍干燥即制得高純度娃娃菜花青素。

所說的步驟1)調(diào)節(jié)濾液的pH值采用的是6mol/L的HCl。

所說的步驟2)的酶解溫度為45-50℃，酶解時(shí)間為60分鐘。

所說的步驟3)的大孔吸附樹脂的型號(hào)為L(zhǎng)SA-21，花青素清液上柱流速為1.0倍柱體積/小時(shí)，上柱溫度為20-50℃。

所說的步驟3)的吸附完成后用體積濃度為85％的乙醇進(jìn)行解吸，且乙醇溶液上柱流速為1.5倍柱體積/小時(shí)，解吸溫度為20℃。

所說的步驟3)的真空濃縮的壓力為0.090-0.095MPa，溫度為40-45℃，冷凍溫度為-40℃-50℃，壓力為20-40Pa，加熱板溫度：65-110℃，凍干時(shí)間為16-22小時(shí)。

本發(fā)明所提取的娃娃菜花青素不僅純度高、色價(jià)高，色值穩(wěn)定，同時(shí)提高了娃娃菜花青素的生物活性，采用本發(fā)明娃娃菜純度達(dá)90％以上，且與乙醇有機(jī)溶劑提取的花青素相比，色價(jià)提高12.6倍。

樣品色價(jià)測(cè)定：

稱取0.1000g花青素粉末，以pH3.0磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液溶解，稀釋定容至100mL，測(cè)定吸光度A530值，按下式計(jì)算色價(jià)。

E1cm1%=ACL]]>

A--530nm處吸光度值；

C-花青素溶液質(zhì)量百分?jǐn)?shù)(％)；

L-比色皿厚度(lcm)

【具體實(shí)施方式】

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1：

1)將成熟娃娃菜經(jīng)清洗泥沙、去除根部、去除病蟲害及殘次包葉后切碎，將切碎的娃娃菜與水按1∶5的質(zhì)量比混合并置于打漿機(jī)中打成漿液，漿液用震動(dòng)篩粗濾并收集濾液，采用6mol/L的HCl調(diào)節(jié)濾液的pH值為3.0；

2)在50℃下按100g娃娃菜∶0.002ml的比例向?yàn)V液中加入復(fù)合果膠酶在45℃酶解60分鐘并澄清，將酶解澄清后的濾液以4000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，離心后所得上清液即花青素清液；