[發(fā)明專利]一種益生菌微膠囊的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710205417.5
• 申請(qǐng)日: 2017-03-31
• 公開（公告）號(hào): CN106993813B
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張合亮;袁立軍;劉穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寶健（北京）生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): A23L33/135
• 分類號(hào): A23L33/135;A23L33/16;A23L33/125;A23P10/30
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

本發(fā)明公開一種益生菌微膠囊的制備方法，包括：益生菌株的培養(yǎng)與活化；離心收集菌體，在菌體中加入復(fù)合冷凍干燥保護(hù)劑；包埋：制備菌液，進(jìn)行包埋，將菌液、包埋壁材溶液與海藻酸鈉溶液混合，攪拌后，將菌液混合液滴到氯化鈣溶液中，固化后，用無菌水洗滌并過濾；將得到的微膠囊進(jìn)行冷凍干燥，即得。本發(fā)明通過采用甲基纖維素?低聚半乳糖接枝共聚物作為包埋壁材，增強(qiáng)了益生菌制劑在儲(chǔ)藏運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性，有效降低了胃酸、膽鹽等對(duì)益生菌體的破壞，具有較強(qiáng)的耐酸耐膽鹽能力，極大提高了益生菌株在小腸內(nèi)的數(shù)量和活性，利于腸道菌群的調(diào)節(jié)和改善，適宜工業(yè)化生產(chǎn)，同時(shí)拓寬了甲基纖維素的應(yīng)用范圍，具有重要的經(jīng)濟(jì)意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及一種益生菌微膠囊的制備方法。

背景技術(shù)

益生菌是一類對(duì)宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。近年來越來越多的研究證實(shí)益生菌能夠抑制致病菌生長，消除致癌因子，維持腸道正常菌群，而且具有緩解乳糖不耐癥，降低膽固醇，提高免疫力等重要生理功效。

雙歧桿菌與乳桿菌是人體腸道內(nèi)重要有益菌，常作為人體健康的重要標(biāo)志，然而它們對(duì)外界環(huán)境較為敏感，極易受到氧、溫度、pH值、水分等因素的影響。從益生菌產(chǎn)品加工、貯藏、運(yùn)輸?shù)阶罱K被食用等過程都會(huì)影響益生菌的生物活性和存活率。因此對(duì)一款益生菌產(chǎn)品而言最終定植于腸道中的活菌數(shù)往往低于能夠發(fā)揮有效作用的理論值，如何保持益生菌的活性和高存活率成為此類產(chǎn)品的關(guān)鍵所在。

電子輻照(Electron irradiation)是一種采用高能電子束來照射材料、以改善材料性能的技術(shù)。它是利用射線與物質(zhì)間的作用，電離和激發(fā)產(chǎn)生的活化原子與活化分子，使之與物質(zhì)發(fā)生一系列物理、化學(xué)等生物化學(xué)變化，導(dǎo)致物質(zhì)的降解、聚合、交聯(lián)、并發(fā)生改性。輻射加工技術(shù)已經(jīng)形成一個(gè)新興產(chǎn)業(yè),輻照加工與常規(guī)加工方法相比,具有節(jié)能、無環(huán)境污染等特點(diǎn),可進(jìn)行常溫加工。高能射線不僅可以處理被加工物表面,同時(shí)可深入其內(nèi)部,且工藝控制簡單。由于輻照技術(shù)對(duì)材料的形態(tài),輻照溫度沒有苛刻的要求,且反應(yīng)快、產(chǎn)品純度高,易控制,可實(shí)行連續(xù)操作,因此被認(rèn)為是一種經(jīng)濟(jì)效益高、節(jié)約能源、節(jié)省人力,無公害或少公害的新加工技術(shù)。

甲基纖維素(MC)是一種長鏈取代纖維素，其中約27％～32％的羥基以甲氧基的形式存在。不同級(jí)別的甲基纖維素具有不同的聚合度，其范圍為50～1000；而其分子量(平均數(shù))的范圍在10000～220000Da之間。

MC在無水乙醇、乙醚、丙酮中幾乎不溶。水溶液在常溫下相當(dāng)穩(wěn)定，具有優(yōu)良的潤濕性、分散性、粘接性、增稠性、乳化性、保水性，耐酸性和成膜性，所成膜具有優(yōu)良的韌性、柔曲性和透明度。纖維素結(jié)構(gòu)規(guī)整，具有致密的晶體結(jié)構(gòu)，大量的羥基被封閉，使得反應(yīng)試劑難以與纖維素反應(yīng)，限制了纖維素的應(yīng)用。通過采用電子輻照技術(shù)對(duì)其進(jìn)行特殊的處理，將纖維素分子鏈中的結(jié)合鍵打開，引入新的官能團(tuán)，就可以改變其固有的特性，增強(qiáng)其耐酸性、保水性、凝膠性、粘結(jié)性和成膜性。

低聚半乳糖是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，其分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1-7個(gè)半乳糖基，它是人體腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌等有益菌極好的營養(yǎng)源和有效的增殖因子。低聚半乳糖還具有較強(qiáng)的耐酸性、耐熱性，不會(huì)因?yàn)樵诩庸み^程中的高溫殺菌及人體胃酸的分解而失去其本來應(yīng)有的特性。

微膠囊技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的一種比較成熟、用途廣泛的高新技術(shù)。由于其顯著的包埋效果也開始被應(yīng)用于益生菌制品的保護(hù)方面。當(dāng)前市面上益生菌產(chǎn)品主要存在以下問題：一、未經(jīng)包埋，直接加入保護(hù)劑，然后凍干成粉并包裝，在胃里一經(jīng)釋放益生菌很容易受到胃酸、膽鹽的破壞；二、包埋中大多采用普通單一壁材，很少使用復(fù)配壁材，存在菌種死亡率高，微膠囊耐酸性差等問題。

傳統(tǒng)的單層包埋不僅產(chǎn)率低而且包埋效果差，不能對(duì)菌體起到很好的保護(hù)作用；三層及以上微膠囊包埋技術(shù)雖然提高了菌體的穩(wěn)定性，但是工藝繁瑣，耗時(shí)，在腸道內(nèi)益生菌株無法快速定植、釋放。