[發明專利]一種益生菌微膠囊的制備方法

有效

• 申請號: 201710205417.5
• 申請日: 2017-03-31
• 公開（公告）號: CN106993813B
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 張合亮;袁立軍;劉穎
• 申請（專利權）人: 寶健（北京）生物技術有限公司
• 主分類號: A23L33/135
• 分類號: A23L33/135;A23L33/16;A23L33/125;A23P10/30
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

1.一種益生菌微膠囊的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）益生菌株的培養與活化；

（2）離心收集菌體，在菌體中加入復合冷凍干燥保護劑；

（3）包埋：制備菌液，進行包埋，將菌液、包埋壁材溶液與海藻酸鈉溶液混合，攪拌后，將菌液混合液滴到氯化鈣溶液中，固化后，用無菌水洗滌并過濾；

（4）將步驟（3）得到的微膠囊進行冷凍干燥，即得；

其中，步驟（3）中，所述包埋壁材為甲基纖維素-低聚半乳糖接枝共聚物，通過如下方法制備：

將相對分子質量為40-60kDa的甲基纖維素按照質量比1: 2-8加入低聚半乳糖預混后，溶于無菌水中，使其混合均勻，采用阿貝折光儀測定折光率，折光率最終控制在1.35-1.44之間，采用磁力攪拌器攪拌15-20min；

將混合好的溶液，裝入耐輻照的PE塑料袋中封存包裝，利用4.5-18MeV電子束，30-60mA束流，90-120kW額定功率的電子加速器輻照，輻照劑量為20-200kGy，輻照劑量率為5-500kGy/hr，輻照結束后以分子截留量為80kDa進行超濾處理，去除未反應的甲基纖維素及低聚半乳糖，收集大于80kDa的組分進行冷凍干燥，即得。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述包埋壁材溶液的濃度為8-15mg/mL；所述菌液中菌體密度為10⁹cfu/mL以上；所述海藻酸鈉溶液中海藻酸鈉的質量百分比為2.5-3.5%。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于：所述菌液、包埋壁材溶液與海藻酸鈉溶液的體積比為1∶1-30∶1-10。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述益生菌為具有益生作用的乳桿菌屬或雙歧桿菌屬中的一種或多種菌株。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，每克菌體中加入1-2.5mL復合冷凍干燥保護劑。

6.根據權利要求1或5所述的制備方法，其特征在于：所述復合冷凍干燥保護劑為甘油0.15-0.25%，甘氨酸0.2-0.5%，乳糖1-2%，山梨醇0.5-1.5%，牛血清白蛋白1.5-2%，在115-121℃條件下滅菌15-20min，冷卻后即得。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述氯化鈣溶液中氯化鈣的質量百分比為1-6%。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述離心是以4000-6000rpm的轉速離心收集6-10min；所述攪拌為120-160r/min，攪拌25-30min；所述固化的時間為30-60min。