[發明專利]利用喜樹懸浮細胞生產喜樹堿和10-羥基喜樹堿的方法有效
| 申請號： | 201710205026.3 | 申請日： | 2017-03-31 |
| 公開（公告）號： | CN107043795B | 公開（公告）日： | 2020-10-09 |
| 發明（設計）人： | 羅應剛;蒲祥;楊云;屈細興;陳菲;張國林 | 申請（專利權）人： | 中國科學院成都生物研究所 |
| 主分類號： | C12P17/18 | 分類號： | C12P17/18;C12N5/04 |
| 代理公司： | 成都賽恩斯知識產權代理事務所(普通合伙) 51212 | 代理人： | 高利丹 |
| 地址： | 610041 四川*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 喜樹 懸浮 細胞 生產 喜樹堿 10 羥基 方法 | ||
1.利用喜樹懸浮細胞生產喜樹堿和10-羥基喜樹堿的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)將喜樹懸浮細胞接種到以MS30液體培養基為基礎培養基，以及不同組成和濃度的生長調節因子的固體培養基上進行培養，培養過程中添加山梨糖醇；所述MS30液體培養基為MS培養基添加30mg/L的蔗糖；所述生長調節因子由0.2～1mg/L萘乙酸、0.2～1mg/L 6-芐基氨基嘌呤、0.05～0.3mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸和20-50mM NH4+/NO3-組成，所述NH4+與NO3-的摩爾比為5:1；培養條件：光照，搖床100～150rpm，溫度25±3℃，pH 5-6.5；(2)收集相應的懸浮細胞和細胞培養液；(3)分離提取喜樹堿和10-羥基喜樹堿。
2.如權利要求1所述的利用喜樹懸浮細胞生產喜樹堿和10-羥基喜樹堿的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，添加濃度為10～200g/L的山梨糖醇。
3.如權利要求1或2所述的利用喜樹懸浮細胞生產喜樹堿和10-羥基喜樹堿的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的生長調節因子由0.5mg/L萘乙酸、0.5mg/L 6-芐基氨基嘌呤、0.1mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸和40mM NH4+/NO3-組成，所述NH4+與NO3-的摩爾比為5:1；培養條件：光照25μmol· m-2·s-l，搖床125rpm，溫度25±0.5℃，pH5-6.5。
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