[發(fā)明專利]一種透明質(zhì)酸寡糖修飾的礦化膠原仿生骨修復(fù)材料及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710192690.9
• 申請日: 2017-03-28
• 公開（公告）號: CN106860915B
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳宗剛;張秀麗;栗敏;顧國鋒;郭忠武
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號: A61L27/46
• 分類號: A61L27/46;A61L27/50;A61L27/56;D01D5/00
• 代理公司: 37219 濟(jì)南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 朱家富

1.一種透明質(zhì)酸寡糖修飾的礦化膠原仿生骨修復(fù)材料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將膠原、透明質(zhì)酸和NaBH₃CN加入反應(yīng)體系中，36～38℃避光條件下攪拌反應(yīng)1～3天，然后加入醋酸溶液稀釋，超濾離心，沉淀干燥后，制得糖基化膠原蛋白；

所述反應(yīng)體系為六氟異丙醇（HFP）或二甲基酰胺（DMF）溶劑之一與碳酸氫鈉的混合溶液，碳酸氫鈉的摩爾濃度為0.05～0.15M，六氟異丙醇或二甲基酰胺與碳酸氫鈉的體積比為3:(1～3)；

所述膠原加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為18～22 g/L，透明質(zhì)酸加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為4～6 g/L，NaBH₃CN加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為6g/L～18g/L；

（2）將步驟（1）制得的糖基化膠原蛋白加入鹽酸中，攪拌溶解，制得濃度為0.5～0.7mg/ml的糖基化膠原蛋白溶液，然后加入CaCl₂溶液，混合均勻，靜置8～15min，然后攪拌加入NaH₂PO₄溶液，調(diào)節(jié)pH至7，25～38℃靜置2～24h，固液分離，沉淀經(jīng)洗滌后，干燥，制得糖基化膠原礦化復(fù)合材料；

所述CaCl₂溶液的添加量為步驟（1）中每克膠原添加0.023～0.0913 mol的CaCl₂；CaCl₂與NaH₂PO₄的摩爾比為（1.5～1.8）：1；

（3）將成型劑溶解于六氟異丙醇中，制得質(zhì)量濃度為2～4%的溶液，然后加入步驟（2）制得的糖基化膠原礦化復(fù)合材料，糖基化膠原礦化復(fù)合材料劑與成型的質(zhì)量比為（1～3）：1，混合均勻，靜電紡絲，制得透明質(zhì)酸寡糖修飾的礦化膠原仿生骨修復(fù)材料；

所述成型劑為膠原、聚乳酸或步驟（1）制得的糖基化膠原蛋白；

制得的透明質(zhì)酸寡糖修飾的礦化膠原仿生骨修復(fù)材料，結(jié)構(gòu)如下：

膠原-羥基磷灰石復(fù)合材料中的膠原通過C-N鍵連接透明質(zhì)酸寡糖，獲得糖基化修飾的礦化膠原復(fù)合材料，透明質(zhì)酸寡糖的分子量為776～5000 Da。

2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中，碳酸氫鈉的摩爾濃度為0.1 M，六氟異丙醇或二甲基酰胺溶劑與碳酸氫鈉的體積比為3:2；所述膠原為I型膠原，加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為20 g/L，透明質(zhì)酸加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為5 g/L，NaBH₃CN加入反應(yīng)體系后的質(zhì)量濃度為6g/L。

3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中，37℃避光條件下攪拌反應(yīng)1天。

4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中，醋酸溶液的質(zhì)量濃度為5%，稀釋體積倍數(shù)為8倍。

5.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中，超濾離心的超濾管為30k，離心條件為：4000 g/min，25 min/次，超濾次數(shù)為3～8次。

6.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中，干燥為真空冷凍干燥。

7.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中，鹽酸的濃度為0.01 M。

8.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中，糖基化膠原蛋白溶液的濃度為0.6mg/ml。

9.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中， pH調(diào)節(jié)劑為濃度為0.1～0.5 M NaOH溶液。

10.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中，37℃靜置22～24h。