[發(fā)明專利]一種果蔬中2,4?二氯苯氧乙酸殘留檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710191624.X
• 申請日: 2017-03-28
• 公開（公告）號: CN107044974A
• 公開（公告）日: 2017-08-15
• 發(fā)明（設計）人: 張萍;鄭大威;曹智;王惠琴;林太鳳;易鵬;劉曉瑩;衛(wèi)曉丹
• 申請（專利權(quán)）人: 北京工業(yè)大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 北京華旭智信知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙)11583
• 代理人: 瓊偉格

技術領域

本發(fā)明屬于食品安全監(jiān)測領域，具體涉及一種果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸殘留檢測方法。

背景技術

2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)按照我國農(nóng)藥毒性分級標準，屬低毒農(nóng)藥，在我國部分蔬菜和糧食上已經(jīng)獲得登記。2,4-D對植物有很強的生物活性,是一類高效、內(nèi)吸、具高度選擇性的除草劑和植物生長調(diào)節(jié)劑。在高濃度時,2,4-D是廣譜除草劑,被廣泛用于水稻、玉米、小麥等禾本科作物、草坪、牧場中的闊葉雜草；低濃度時,2,4-D作為植物生長調(diào)節(jié)劑可以促進作物生長,提高座果率，增大果實等，此外，2,4-D作為食品添加劑，還是應用廣泛的水果防腐保鮮劑,主要用于增強果實抗病力、延緩果實衰老、延長水果貯藏期等。2,4-D在自然界中難以降解，導致2,4-D易于淋溶遷移進入水體和土壤，進而在生物體內(nèi)積累，對人類健康和自然生態(tài)環(huán)境都有較大危害。作為除草劑和保鮮劑使用,2,4-D會在作物和果疏中產(chǎn)生殘留,對人畜有一定的毒副作用。一些國家和國際組織在糧食作物、果疏、飲用水和環(huán)境標準中對2,4-D農(nóng)藥的殘留上限作了嚴格規(guī)定。因此,開發(fā)2,4-D殘留的快速檢測具有重要意義。

目前，2,4-D檢測方法有衍生氣相色譜法(GC)、衍生氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS)等。由于它含有強極性基團羧基，前兩種方法直接檢測時色譜峰拖尾，分析靈敏度低，為了提高弱酸的揮發(fā)性，需要在檢測前將其衍生化為酯。衍生化的引入使操作變得繁瑣，且耗費時間較長。液相色譜分析不需要衍生化，但前處理提純要求嚴格，操作繁瑣，不適宜大量樣本的現(xiàn)場檢測分析。

表面增強拉曼散射(SERS)效應是指在特殊制備的一些納米金屬表面或溶膠中,在激發(fā)區(qū)域內(nèi),導致納米金屬表面或附近吸附分子的拉曼散射信號大大增強的現(xiàn)象。作為一種分子光譜指痕鑒定方法，與高效液相色譜法相比，SERS具有檢測速度快、操作簡便、樣品處理簡單、便于攜帶等優(yōu)點，是一種高靈敏度、高分辨率和方便快捷的檢測技術。本發(fā)明采用SERS方法檢測2，4-D農(nóng)藥殘留，簡單、快速、便攜、準確，適用于在食品安全現(xiàn)場實時、快速的篩查方法，為食品安全監(jiān)測提高技術保障。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸殘留表面增強拉曼光譜快速檢測方法。本發(fā)明的技術方案如下：

步驟一：納米金溶膠的制備：采用檸檬酸三鈉還原氯金酸的方法制備納米金溶膠，將氯金酸水溶液加熱至沸騰，迅速加入檸檬酸三鈉溶液，繼續(xù)攪拌加熱，至顏色至酒紅色得到合適粒徑的納米金溶膠；

步驟二：標準溶液的配置：用甲醇水溶液將2,4-二氯苯氧乙酸分別配置系列濃度梯度為20，15，10，5，2,1μg/mL，取上述溶液分別與步驟一中的金溶膠按1∶5的比例混合，進行拉曼光譜檢測，得到各濃度梯度溶液的表面增強拉曼光譜圖；根據(jù)2,4-二氯苯氧乙酸的定性特征峰進行定性；以濃度為橫坐標，2,4-二氯苯氧乙酸的特征峰的峰高為縱坐標，制作對應的標準曲線用以定量分析；

步驟三：儀器條件的設置：便攜式拉曼光譜儀檢測參數(shù)設定為785nm激光波長，200-300mW激光功率，掃描波長為400-1800cm^-1，積分時間5-15s；

步驟四：實際樣品的表面增強拉曼光譜檢測：

取10.0g蔬菜或水果勻漿經(jīng)過提取，離心，凈化濃縮，定容至2mL，采用步驟三中的步驟，得到表面增強拉曼光譜圖；根據(jù)對應的定性特征峰，判定實際樣品中是否含有2,4-二氯苯氧乙酸；根據(jù)步驟二得到的標準曲線，確定果疏中2,4-二氯苯氧乙酸的含量。

根據(jù)上述一種果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸殘留檢測方法，所述步驟一中濃度為0.01％-0.5％氯金酸的體積為50mL，1％檸檬酸三鈉溶液的加入量為0.5-5.0mL；加熱溫度為100-160℃；加熱時間為5-60min。

根據(jù)上述一種果蔬中2,4-二氯苯氧乙酸殘留檢測方法，所述步驟二中標準溶液的配置包括：稱取2,4-二氯苯氧乙酸粉末0.0200g，用甲醇水溶液溶解定容至100mL，制得200μg/mL儲備液，利用甲醇水溶液將200μg/mL上述儲備液稀釋至20μg/mL、15μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、2μg/mL、1μg/mL的標準系列濃度，繪制標準曲線。