[發明專利]一種檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的引物及其應用

在審

• 申請號: 201710186149.7
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN106834518A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 任緒義;羅英;張鋒;周韻
• 申請（專利權）人: 杭州迪安醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙)32204
• 代理人: 丁靜靜,肖明芳

1.TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的引物，其特征在于，包括如下引物和探針：

用于擴增ADH1B基因rs1229984多態性位點的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

用于擴增ALDH2基因rs671多態性位點的引物：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；

檢測ADH1B基因rs1229984位點多態性的TaqMan-MGB探針，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示；

檢測ALDH2基因rs671位點多態性的TaqMan-MGB探針，其核苷酸序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示；

其中SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：7在5’末端標記Fam信號，SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：8在5’末端標記VIC信號；

其中，引物SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和探針SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6在同一管中共同使用；引物SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和探針SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8在同一管中共同使用。

2.權利要求1所述TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的引物在檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性中的應用。

3.一種TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的試劑盒，其特在于，包括權利要求1所述的引物和探針以及如下試劑：2xPCR反應混合液、陽性標準品。

4.根據權利要求3所述的TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的試劑盒，其特在于，所述2xPCR反應混合液的配方如下：PCR反應緩沖液、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺和dNTPs。

5.根據權利要求3所述的TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的試劑盒，其特在于，所述陽性標準品為AA基因型質粒和GG基因型質粒。

6.TaqMan-MGB探針法檢測ADH1B基因和ALDH2基因多態性的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)模板的準備：提取待測樣品DNA；

(2)實時熒光定量PCR反應：將以步驟(1)提取的DNA為模板、權利要求1所示的引物和探針進行實時熒光定量PCR擴增反應；

(3)結果判讀：根據檢測到的熒光信號值，在實時熒光定量PCR儀上的“端點基因分型”模式下，根據每個樣品點的顏色和對應的基因型，直接判讀結果。