[發明專利]重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201710183433.9 | 申請日： | 2017-03-24 |
| 公開（公告）號： | CN107151270B | 公開（公告）日： | 2018-07-31 |
| 發明（設計）人： | 吳克 | 申請（專利權）人： | 武漢博沃生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/62;A61K39/095;A61K47/64;A61P31/04 |
| 代理公司： | 上海精晟知識產權代理有限公司 31253 | 代理人： | 熊嫻;馮子玲 |
| 地址： | 430075 湖北省武漢市東湖高新區*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 fhbp nada 融合 蛋白 載體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體，其特征在于：包括重組ΔfHbp、柔性連接肽段和NadA，所述重組ΔfHbp包含fHbp可變體V1的VA、VB結構域以及fHbp可變體V3的VC、VD、VE結構域；
所述重組ΔfHbp的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，其核苷酸編碼序列如序列表SEQ ID NO：2所示；
所述柔性連接肽段的核苷酸編碼序列如序列表SEQ ID NO：3所示；
所述重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：4所示，其核苷酸編碼序列如序列表SEQ ID NO：5所示。
2.權利要求1所述的重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體的制備方法，其特征在于：步驟包括：
S1、設計引物分別擴增得到fHbp V1基因片段、fHbp V3基因片段，再以這兩段基因片段為模板進行搭橋PCR擴增得到重組的ΔfHbp全長片段，回收Δfhbp基因片段和pET載體，制備重組質粒pET-ΔfHbp；
S2、設計引物擴增得到NadA蛋白的全長CDS序列，回收NadA基因片段和重組質粒pET-ΔfHbp，制備重組質粒pET-ΔfHbp-NadA；
S3、將重組質粒pET-ΔfHbp-NadA轉化表達菌株，得到重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體。
3.權利要求1所述的重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體在制備多糖-蛋白綴合疫苗中的應用。
4.一種多價腦膜炎球菌綴合疫苗，其特征在于：A群、C群、Y群和W135群腦膜炎球菌莢膜多糖與權利要求1所述的重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體綴合。
5.一種肺炎球菌綴合疫苗，其特征在于：肺炎球菌莢膜多糖與權利要求1所述的重組ΔfHbp-NadA融合蛋白載體綴合。
6.如權利要求5所述的肺炎球菌綴合疫苗，其特征在于：所述肺炎球菌莢膜多糖是分離提純血清型肺炎球菌莢膜上的莢膜多糖，所述血清型肺炎球菌的血清型包括1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、33F。
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