[發明專利]一種促甲狀腺激素檢測試紙及其制備方法

在審

• 申請號: 201710181739.0
• 申請日: 2017-03-24
• 公開（公告）號: CN106841605A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 歐衛軍;孫一品;邵志燕;徐秋楠
• 申請（專利權）人: 南通伊仕生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 南京正聯知識產權代理有限公司32243
• 代理人: 錢靚

技術領域

本發明屬于醫學檢驗試劑領域，涉及一種促甲狀腺激素檢測試紙及其制備方法。

背景技術

促甲狀腺激素是調控甲狀腺細胞生長和甲狀腺激素合成、分泌的主要因子，由垂體促甲狀腺激素細胞合成和分泌，并受甲狀腺激素的負反饋性調節。甲狀腺功能改變時，促甲狀腺激素的波動較甲狀腺激素更迅速且顯著，是反映下丘腦—垂體—甲狀腺軸功能的敏感指標，因此檢測促甲狀腺激素水平可以反映甲狀腺功能狀態。促甲狀腺激素的檢測具有重要的臨床意義，如甲狀腺疾病的篩查、甲狀腺疾病治療效果的監測、非甲狀腺疾病時垂體-甲狀腺軸功能的判斷、亞臨床甲狀腺疾病的診斷及其治療指導、毒性彌漫性甲狀腺腫（格雷夫斯病）藥物治療的預后判斷等。對妊娠期婦女促甲狀腺激素的檢測較非妊娠人群更有必要。在妊娠期間，甲狀腺激素會發生顯著變化，通過促甲狀腺激素測定及時監測妊娠前以及妊娠期甲狀腺功能狀況，指導生育時機選擇，減少流產、早產、胎兒宮內發育遲緩、死胎、死產、子代內分泌及神經系統發育不全、智力低下等都有重大意義，能避免不良妊娠結局的發生，可降低孕產婦死亡率，減輕社會及家庭的負擔，以達到優生優育、提高出生人口素質的目的。

甲狀腺功能狀態的監測及甲狀腺功能紊亂治療的復查均需定期檢測甲狀腺功能相關激素水平。但目前，TSH水平的檢測均需到醫院進行多次抽血檢測，有創，患者依從性差；而尿液是重要的體液成分之一，可以無創、大量、反復取樣，患者配合度高。血液循環中游離甲狀腺激素發揮生物學功能后，部分經尿液排出體外，二者間存在密切相關性。鑒于促甲狀腺激素檢測結果的重要臨床意義，其檢測方法有很多，主要有放射免疫分析法（RIA）、酶聯免疫吸附（ELISA）、時間分辨免疫熒光測定技術（TRIFMA）、化學發光測定技術等，而這些方法都需要有昂貴的儀器和專業的操作，所需費用較高。

發明內容

本發明的目的是為了克服以上的不足，提供一種檢測方便、檢測速度快、檢測效率高、價格便宜的促甲狀腺激素檢測試紙及其制備方法。

本發明的目的通過以下技術方案來實現：一種促甲狀腺激素檢測試紙，包括塑料基片，塑料基片上設有上樣墊和吸水墊，上樣墊和吸水墊上均設有保護膜，上樣墊和吸水墊之間下方設有硝酸纖維素膜，上樣墊的連接端設有固相化膠體金，固相化膠體金的一端與硝酸纖維素膜的一端搭接在一起，硝酸纖維素膜上依次包被有檢測線和質控線；

促甲狀腺激素檢測試紙的制備方法，包括以下步驟：

A、硝酸纖維素膜的制備：

a、選擇3um～10um孔徑的硝酸纖維素膜，根據需要將膜分切成寬度為大于等于2.0cm,長度為30.5cm的規格備用；

b、用0.1M磷酸鹽緩沖液配制供檢測線包被使用的TSH-α單克隆抗體1.5 mg/ml及用質量百分含量0.85%的氯化鈉緩沖液配制供質控線包被使用的抗鼠IgG多克隆抗體1.5mg/ml；

c、選擇硝酸纖維素膜的抗體包被面并作標記，將需包被的檢測線和質控線平行均勻的包被在膜片上，且檢測線與質控線的間距控制在0.5cm，硝酸纖維素膜在4℃～35℃的恒溫條件下干燥備用；

d、配置封閉處理浸泡液，向配液罐加入實際生產量的純化水；用電子分析天平稱量0.1Mol緩沖液、質量百分含量0.5%糖份、質量百分含量1%封閉蛋白、質量百分含量0.05％防腐劑，直接加入到配液罐中攪拌，攪拌直至完全溶解，加純化水定容至所需體積，充分攪拌均勻，攪拌時間不少于10分鐘，備用；

e、將包被膜放于處理槽中，加入配好的溫度大約在36℃0.01M的PBS緩沖液，確保每條膜完全浸沒在0.01M的PBS緩沖液中5分鐘，并且膜不移動、不重疊，5分鐘后將膜從處理槽中取出，將0.01M的PBS緩沖液倒掉；再將第一次用0.01M的PBS緩沖液浸泡過5分鐘的膜放入處理槽中，加入配好的0.01M的PBS緩沖液，確保每條膜完全浸沒在0.01M的PBS緩沖液中30分鐘，并且膜不移動、不重疊，30分鐘后將膜從處理槽中取出，將0.01M的PBS緩沖液倒掉；然后將用0.01M的PBS緩沖液浸泡過兩次的膜放于處理槽中，用配好的封閉處理浸泡液浸泡，確保每條膜完全浸沒在處理液中15分鐘，并且膜不移動、不重疊，15分鐘后將膜從處理槽中取出，用鑷子將每框的膜重新拉一邊，確保膜沒有已到框子外面和沒有膜重疊后，再將框子和膜放入處理液中繼續浸泡20分鐘，20分鐘后將膜從處理槽中取出，用鑷子將膜拉在紗布上晾稍干；