[發(fā)明專利]提高淡紫紫孢菌產(chǎn)白灰制菌素的發(fā)酵培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710178236.8
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN106967769B
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊凡;史宣杰;馬凱;蔡毓新;趙秀山;趙肖斌;唐艷領(lǐng);王琰
• 申請（專利權(quán)）人: 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 河南科技通律師事務(wù)所 41123
• 代理人: 樊羿;韓松

本發(fā)明涉及一種提高淡紫紫孢菌產(chǎn)白灰制菌素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括以下重量份的原料：葡萄糖45～55份、蛋白胨4.5～5.5份、酵母提取物4.5～5.5份、K₂HPO₄ 0.5～2.0份、Na₂CO₃ 8.5～12.5份、MgSO₄·7H₂O 0.1～0.5份、玉米粉1.5～10份、FeSO₄·7H₂O 0.005～0.05份和尿素1.5～10.5份。利用該培養(yǎng)基提高淡紫紫孢菌產(chǎn)白灰制菌素的培養(yǎng)方法包括以下步驟：發(fā)酵培養(yǎng)淡紫紫孢菌搖瓶培養(yǎng)菌液、利用本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行種子罐培養(yǎng)、將種子罐培養(yǎng)菌液接種發(fā)酵罐發(fā)酵。采用本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)淡紫紫孢菌具有成本低、發(fā)酵周期短、白灰制菌素產(chǎn)量高等特點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及一種提高淡紫紫孢菌產(chǎn)白灰制菌素的發(fā)酵培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

黃瓜根結(jié)線蟲(Meloidogyne spp.)屬于側(cè)尾腺綱(Secernentea)、墊刃目(Tylenchida)、異皮總科(Heteroderoidea)、黃瓜根結(jié)線蟲科(Meloidogyne)中的黃瓜根結(jié)線蟲屬(Meloidogyne Goeldi)，是一類嚴(yán)重危害經(jīng)濟(jì)農(nóng)作物并廣泛分布于世界各地的重要的植物病原線蟲。黃瓜根結(jié)線蟲具有非常廣的寄主范圍，它不僅可以侵染經(jīng)濟(jì)性的糧食作物、蔬菜以及觀賞性的花卉樹木，甚至連雜草都可以侵染。黃瓜根結(jié)線蟲病害可以使經(jīng)濟(jì)作物減產(chǎn)10～20%，嚴(yán)重時達(dá)到75%以上，甚至導(dǎo)致絕收。在我國，由于農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展、產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的不斷改革調(diào)整、種植制度的不斷合理優(yōu)化以及溫室和大棚栽培面積的迅速發(fā)展，再加上農(nóng)民的管理意識淡薄，從而導(dǎo)致黃瓜根結(jié)線蟲病害發(fā)病程度逐年呈上升趨勢，如我國南方黃瓜根結(jié)線蟲造成寄主作物常年減產(chǎn)15～20%，嚴(yán)重時達(dá)到70%以上。黃瓜根結(jié)線蟲不僅造成作物減產(chǎn)，而且也同時誘發(fā)寄主產(chǎn)生其它的病害如根腐、青枯病、枯萎病和煙草黑脛病。目前，由黃瓜根結(jié)線蟲引起的病害已嚴(yán)重制約著我國保護(hù)地作物的發(fā)展和穩(wěn)產(chǎn)，影響著全國農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)持續(xù)快速健康的發(fā)展。

淡紫紫孢菌（Purpureocillium lilacinum）作為一種線蟲生防因子，大量研究表明其不僅有廣泛的寄主范圍，而且可以適應(yīng)不同的氣候條件，可以寄生于南方根結(jié)線蟲、孢囊線蟲、異皮線蟲、金色線蟲、穿刺線蟲和珍珠線蟲等多種線蟲。淡紫紫孢菌因為具有流行觸殺性、安全無污染性以及和發(fā)展環(huán)境友好型社會相符合的特點，可以作為一種新的有效生防因子，而且克服了傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥帶來的諸多問題，是極具推廣潛力的應(yīng)用生防菌和功能菌。

Park等在淡紫紫孢菌發(fā)酵液中檢測到白灰制菌素的存在，并用來作為線蟲活性的指示劑，目前已被廣泛的用于防治植物線蟲。白灰制菌素是由非核糖體代謝途徑產(chǎn)生的廣泛存在于植物、細(xì)菌和真菌中的一種九環(huán)脂肽類物質(zhì)。白灰制菌素有很多組分組成，其中白灰制菌素A和B是廣泛而大量存在的，其余的還有白灰制菌素D、E、F、H、K和L等組分，其中白灰制菌素A的作用是抑制線粒體ATP的合成和參與不同的磷酸代謝途徑。

但目前現(xiàn)有技術(shù)中，淡紫紫孢菌的快速繁殖及白灰制菌素產(chǎn)量的提高仍存在著亟待解決的技術(shù)難題。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種提高淡紫紫孢菌產(chǎn)白灰制菌素的發(fā)酵培養(yǎng)基，采用該發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)淡紫紫孢菌具有成本低、發(fā)酵周期短、白灰制菌素產(chǎn)量高等特點。

為解決上述問題，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：