[發明專利]提高淡紫紫孢菌產白灰制菌素的發酵培養基及培養方法

有效

• 申請號: 201710178236.8
• 申請日: 2017-03-23
• 公開（公告）號: CN106967769B
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 楊凡;史宣杰;馬凱;蔡毓新;趙秀山;趙肖斌;唐艷領;王琰
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院園藝研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 河南科技通律師事務所 41123
• 代理人: 樊羿;韓松

1.一種提高淡紫紫孢菌（Purpureocillium lilacinum）產白灰制菌素的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）搖瓶發酵培養

將活化的淡紫紫孢菌菌液接入搖瓶中培養，得到懸液后，再在轉速為200rpm、溫度為28℃的條件下震蕩培養36～48h，至OD₆₀₀=0.8～1.2，得搖瓶培養菌液；

（2）種子罐培養

在種子罐內設置提高淡紫紫孢菌產白灰制菌素的發酵培養基，所述發酵培養基中含有以下濃度的原料：葡萄糖50.0g/L、蛋白胨5.0g/L、酵母提取物5g/L、K₂HPO₄ 1.0g/L、Na₂CO₃10.0g/L、MgSO₄·7H₂O 0.2g/L、玉米粉3g/L、FeSO₄·7H₂O 0.047g/L和尿素5g/L；所述發酵培養基的pH值為7.8～8.0；

將步驟（1）所得搖瓶培養菌液接入種子罐中，搖瓶培養菌液接種量為發酵培養基的1～3wt%，在通氣量為1.4L/h、溫度28℃、轉速180rpm的條件下，發酵培養36～54h，至溶氧量下降到20～30%，得種子罐培養菌液；

（3）發酵按5～10wt%的接種量將所得種子罐培養菌液接種發酵罐，進行發酵；

發酵的參數控制如下：發酵中期，當溶氧量下降至50%時，將氣液體積比調整為1.0～1.8；發酵后期，當溶氧量下降至50%時，將氣液體積比調整為2.1～2.7，保持通氣量，直至發酵結束，此過程中溫度維持在25～30℃，轉速200rpm；

所述通氣量和溫度的控制方法如下：開始發酵時，控制氣液體積比為0.4～0.7；發酵中期，當溶氧量下降至50%時，將氣液體積比調整為1.4～1.6；發酵后期，當溶氧量下降至50%，將氣液體積比調整為2.1～2.3，保持通氣量，直至發酵結束。

2.根據權利要求1所述培養方法，其特征在于：在所述步驟（1）中，所述搖瓶中的發酵培養基為馬鈴薯葡萄糖液體培養基，每升該培養基由馬鈴薯200g和葡萄糖20g加水定容，混合均勻，滅菌而成。