[發明專利]一種從賽北紫堇中提取分離白毛茛堿的方法

有效

• 申請號: 201710172755.3
• 申請日: 2017-03-22
• 公開（公告）號: CN106939006B
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 廖志新;陳慧楓;張晶;張姍姍;公程程
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: C07D491/056
• 分類號: C07D491/056
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

本發明公開了一種從賽北紫堇中提取分離白毛茛堿的方法，屬于天然產物提取分離技術領域，該方法以罌粟科紫堇屬植物賽北紫堇為原料，經過粉碎堿化、超臨界CO₂萃取、膜分離技術結合陽離子交換樹脂和重結晶的方法實現了賽北紫堇中高純度白毛茛堿的分離。本發明所用的方法有毒試劑用量少，產率高達0.43％，且白毛茛堿的純度可達99.0％。

技術領域

本發明涉及一種從罌粟科紫堇屬植物中提取、分離白毛茛堿的方法，具體是一種從賽北紫堇中大量制取高純度白毛茛堿的方法。

背景技術

賽北紫堇(Corydalis impatiens)為罌粟科紫堇屬植物，收載于《中華本草》藏藥卷，其根、莖、葉、花均可入藥，具有除熱消腫、活血散瘀、收斂止癢、祛風利氣等功效。賽北紫堇廣泛分布在青海、西藏、甘肅、四川及內蒙古等地，為藏藥常用藥材。本屬植物主要含芐基異喹啉類、苯酚異喹啉類、苯并菲啶類、小檗堿類、阿樸菲類、普羅托品類及螺芐異喹啉類等結構類型的生物堿。

白毛茛堿(hydrastine)又稱北美黃連堿，是一種苯酚異喹啉類生物堿，由阿爾弗雷德·杜蘭德發現于1851年。有研究表明，白毛茛堿可以顯著抑制耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)，有預防感染的功效；對具有多藥耐藥性的惡性瘧原蟲菌株有明顯的抑制效果，且對正常細胞沒有毒性；白毛茛堿可以抑制CYP2E1的活性，對對乙酰氨基酚引起的肝臟損傷起到防護作用；抑制PAK4激酶活性從而抑制下游與腫瘤增長有關的信號分子，引起肺癌細胞凋亡，起到抗腫瘤的作用。此外，白毛茛堿還有降血壓、調節平滑肌和止血等功能。

目前只有從賽北紫堇中提取總生物堿的文獻，而分離白毛茛堿的文獻較少，且所得白毛茛堿的產率低于萬分之一。如專利CN103610762(一種塞北紫堇總生物堿提取物及提取方法，申請號201310680353.6)采用堿性乙醇回流提取總生物堿，其中白毛茛堿的含量較低。由于生物堿在天然植物中的含量較低，用水提或有機溶劑提取的方法會引入其他成分，為了得到高純度的白毛茛堿單體必須對其進行精制純化。

發明內容

技術問題：本發明的目的在于提供一種從賽北紫堇中提取分離白毛茛堿的方法，該方法成本低、操作簡單，得到的白毛茛堿產量大且純度高達99％。

技術方案：本發明提供的一種從賽北紫堇中提取分離白毛茛堿的方法，包括以下步驟：

步驟1.粉碎、堿化：將賽北紫堇全草陰干，粉碎至40-60目，得到賽北紫堇粉末，加入Na₂CO₃溶液浸泡3-4小時，晾干后過40-60目篩；

步驟2.超臨界提取：將處理好的賽北紫堇粉末裝入超臨界萃取釜中，超臨界CO₂萃取，用乙醇溶液為夾帶劑動態提取，解析萃取液并回收乙醇，得到粗生物堿；

步驟3.微濾：將粗生物堿浸膏溶解在酸水中并調節溶液pH值至2-3，將此溶液用孔徑在0.5-1.0微米的陶瓷膜進行微濾處理，控制微濾溫度在25-35℃，微濾壓力在0.5-0.7MPa，除去顆粒物和高分子物質；

步驟4.超濾：將微濾后的溶液用聚砜中空纖維超濾膜進行超濾處理，分子截留量在4000-8000D，控制超濾壓力在0.1-0.3MPa，操作溫度為25-35℃，溶液pH值維持在2-3，除去大分子物質如多糖、膠質、蛋白質及色素；

步驟5.離子交換樹脂分離：將所得濾液過處理好的酸性陽離子交換樹脂柱，調節上樣流速，先用去離子水沖洗至中性，除去水溶性小分子雜質，再調節洗脫流速用1％Na₂CO₃溶液堿化50-80％乙醇洗脫，收集洗脫液用碘化鉍鉀顯色劑檢測，直至無生物堿流出為止，合并檢測呈陽性的洗脫液；

步驟6.重結晶：將所得的上述洗脫液減壓濃縮、干燥，加入二氯甲烷溶解過濾，然后用常規方法重結晶，過濾，得到結晶物即為白毛茛堿。

其中，